[发明专利]一种作物促生内生真菌及其应用

说明书

本发明公开了一种内生真菌(Glutinomyces sp.)32R‑20，其保藏编号为CGMCC No.18139。其从铃木根系中分离得到。可将本申请作物促生内生真菌应用于禾本科植物、兰科植物以及十字花科作物栽培。本发明作物促生内生真菌对禾本科植物、兰科植物以及十字花科作物均具有促进生长的效果，其可促进白菜、甘蔗的根系生长，还可显著提高铁皮石斛生物量以及多糖的含量，促进铁皮石斛的生长。本申请作物促生内生真菌对兰科代表作物铁皮石斛、十字花科代表作物白菜、禾本科代表作物甘蔗均具有促进生长效果，是一种广谱的促生菌株。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种作物促生内生真菌及其应用。

背景技术

近年来由于大量施用化肥对粮食安全、生态环境和资源利用产生的危害已经引起全世界的广泛重视。减少化肥施用和提高化肥的利用率是当前农业生产中需解决的重要问题。目前，利用自然界中植物共生微生物促进农作物生长的有效措施及相关研究,正在成为农业环境保护、可持续性发展的一个重要方向。许多植物与微生物可以建立互利共生关系，植物与微生物菌在侵染的过程中形成互作关系，微生物菌可促进植物的生长，影响植物的产量、质量以及有效成分的变换。常见的互利共生植物有根瘤菌、固氮菌等，其中植物内生真菌是植物共生真菌的代表之一。而目前，对白菜、甘蔗等作物的促生菌或者抗病菌的研究利用较少。筛选和利用具有促生作用的微生物菌株，不但可以提高作物产量和品质，还可以减少化肥的施用，实现我国提出的化肥、农药的双减目标，保护农业生态环境。

铁皮石斛为兰科石斛属多年生附生草本植物，具有很好的滋阴润肺、抗衰老、抗肿瘤等功效。兰科植物与真菌共生形成内生菌根是一种自然界的普遍现象。而目前，也有研究表明，铁皮石斛共生真菌能够提高幼苗成活率和生物产量以及提高铁皮石斛抗旱性等效果，例如文献：“铁皮石斛优良菌根真菌的筛选”徐超等著，江苏农业科学，2017年第45卷第24期。其指出铁皮石斛共生真菌JSNL001、JSNL002、JSNL003、JSNL004、JSNL005、JSNL006、JSNL007对铁皮石斛均具有不同程度的侵染性，同时也具有不同程度的铁皮石斛促生和抗旱效果。因此，筛选和培养出具有促生铁皮石斛生长的菌株具有重要意义。蔗糖产业是广西经济发展的支柱产业，对当地农民的脱贫致富作出了非常大的贡献，广西的甘蔗和蔗糖产量占全国60％以上。但是，一直以来我国甘蔗成本高，缺乏国际竞争力。在甘蔗种植的农资投入中，化肥所占的比重最大，对甘蔗产量的影响也最为显著。此外，我国甘蔗主产区蔗地90％以上为旱坡地，土壤保水保肥能力差，化肥利用率低。因此，充分发挥自然生态系统中的共生微生物的促生潜力，提高我国甘蔗的生产能力，保护和改善蔗地的生态环境，对促进我国甘蔗产业的可持续性发展具有重要意义。白菜是一种全球受欢迎的蔬菜，也是十字花科叶菜类蔬菜的典型代表，筛选和利用促生菌株可提高蔬菜的产量和品质，减少化肥的使用。

发明内容

本发明克服了上述技术问题，提供可一种作物促生内生真菌。

本发明的内生真菌(Glutinomyces sp.)32R-20，属于真菌界，子囊菌门，盘菌纲，柔膜菌目，晶杯菌科，Glutinomyces属，未知种。所述内生真菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNo.18139，保藏日期为2019年07月04日。

本申请的内生真菌菌株在CMMY培养基上生长较慢，28℃下培养两周后菌落直径15-20mm左右，圆形至近圆形，白色，间杂褐色，绒毡状，不产生分生孢子。

上述的作物促生内生真菌的分离方法包括如下步骤：

将新鲜健康的植物根系用流水冲洗表面的泥土，自然晾干，剪切成片段组织样，每种组织样随机取15个片段依次用质量百分含量为75％乙醇溶液浸泡15～60s，再用1％次氯酸钠浸泡1～3min，再采用无菌水冲洗3次以上；再将组织样平放于玉米粉培养基平板上，置于22～30℃培养箱培养1～3d；采用菌丝尖端挑取法挑取组织块下或周缘生长的菌丝转接于麦芽汁培养基上培养；挑取得到的菌丝菌株即为所述作物促生内生真菌；