[发明专利]一种纳米卟啉紫外传感检测半胱氨酸的方法有效
申请号: | 202010704465.0 | 申请日: | 2020-07-21 |
公开(公告)号: | CN112082966B | 公开(公告)日: | 2022-08-09 |
发明(设计)人: | 佘远斌;乔文君;付海燕;周春松;胡瑛 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
主分类号: | G01N21/33 | 分类号: | G01N21/33;G01N23/04;G01N23/20 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 邱启旺 |
地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 纳米 卟啉 紫外 传感 检测 半胱氨酸 方法 | ||
1.一种纳米卟啉紫外传感检测半胱氨酸的方法,其特征在于,具体按如下步骤执行:
(1)纳米卟啉紫外传感器的合成:向溶解有十二烷基苯磺酸钠水溶液(SDBS)中加入完全溶解的四-(4-羧基苯基)钴卟啉的N,N-二甲基甲酰胺溶液,其中,四-(4-羧基苯基)钴卟啉与十二烷基苯磺酸钠的物质的量比为1:(50~250),在30~80℃下剧烈搅拌反应5~30分钟,使四-(4-羧基苯基)钴卟啉自组装纳米化,溶液由浑浊变澄清,得到自组装纳米化的四-(4-羧基苯基)钴卟啉溶液,即纳米卟啉紫外传感器;
(2)纳米卟啉紫外传感器对半胱氨酸的识别与定量分析:将步骤(1)制得的自组装纳米化的四-(4-羧基苯基)钴卟啉溶液加入到pH为5.0~9.0的Tris-HCl缓冲液中制得检测溶液,所述检测溶液中,自组装纳米化的四-(4-羧基苯基)钴卟啉溶液的紫外吸光度为0.2-0.8;在所述检测溶液中加入待测半胱氨酸溶液,避光混合后,采集紫外光谱数据并计算加入半胱氨酸后紫外吸光度降低值与纳米卟啉原始紫外吸光度A0的比值(A0-A1)/A0,其中A1为加入半胱氨酸后紫外吸光度值,根据标准拟合曲线或公式获得待测溶液中半胱氨酸的浓度;其中,标准拟合曲线绘制方法如下:
分别在配制的检测溶液中加入不同浓度的半胱氨酸标准液,采集其避光混合后的紫外光谱数据,以半胱氨酸标准液的浓度为横坐标,加入半胱氨酸后紫外吸光度降低值与纳米卟啉原始紫外吸光度的比值为纵坐标,绘制获得标准拟合曲线。
2.根据权利要求1所述的一种纳米卟啉紫外传感检测半胱氨酸的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,四-(4-羧基苯基)钴卟啉与十二烷基苯磺酸钠的物质的量比优选为1:(100~180)。
3.根据权利要求1所述的一种纳米卟啉紫外传感检测半胱氨酸的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,制得自组装纳米化四-(4-羧基苯基)钴卟啉的形貌为球形,直径为100±20nm。
4.根据权利要求1所述的一种纳米卟啉紫外传感检测半胱氨酸的方法,其特征在于,Tris-HCl缓冲溶液优选为pH=7.0,避光混合时间为3~15分钟。
5.根据权利要求1所述的一种纳米卟啉紫外传感检测半胱氨酸的方法,其特征在于,检测溶液中,纳米化的四-(4-羧基苯基)钴卟啉浓度为1.1×10 -6~9.38×10 -6 mol/L。
6.根据权利要求1所述的一种纳米卟啉紫外传感检测半胱氨酸的方法,其特征在于,半胱氨酸的浓度为2.0×10 -6~9.0×10 -6 mol/L时,与四-(4-羧基苯基)钴卟啉的紫外吸光度降低呈良好的线性关系,表示为:Y=0.02708X+0.03197,其中,Y是加入半胱氨酸后紫外吸光度降低值与纳米卟啉原始紫外吸光度的比值,X是半胱氨酸的浓度,根据公式计算半胱氨酸的浓度。
7.按照权利要求1所述的一种纳米卟啉紫外传感检测半胱氨酸的方法,其特征在于,所述检测溶液为含有金属离子或复杂基质的溶液。
8.根据权利要求1所述的一种纳米卟啉紫外传感检测半胱氨酸的方法,其特征在于,纳米化的四-(4-羧基苯基)钴卟啉紫外传感定量识别的氨基酸为D/L-半胱氨酸。
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