[发明专利]一种圆锥绣球的离体芽培养方法

说明书

本发明公开了一种圆锥绣球的离体芽培养方法，包括：外植体的采集；外植体分别在洗衣粉中浸泡、流水下冲洗、多菌灵和链霉素混合液中浸泡、无菌水冲洗，后进行表面消毒：75％酒精浸泡、无菌水冲洗、HgCl₂溶液浸泡、无菌水冲洗；将经过消毒灭菌的外植体两端切口处做修剪，剪成带芽茎段，直立式接种于启动培养基上；将经过启动培养的组培苗，剪成带芽茎段，减掉可接触到培养基的叶片，垂直接种于增殖培养基中；增殖培养后，将组培苗基部进行修剪，转入生根培养基进行根的诱导。该方法启动效果好、褐化率、污染率低，褐化率为0，污染率低至5％；萌芽诱导率、增殖系数高，萌芽率达100％，增殖系数达7；生根苗健壮，生根率达100％，平均根量达22条，平均根长3.10cm。

技术领域

本发明涉及植物培养技术，特别涉及一种圆锥绣球的离体芽培养方法。

背景技术

圆锥绣球(Hydrangea paniculata Sieb.et Zucc)是虎耳草科绣球属植物，落叶灌木。枝暗红褐色或灰褐色。叶纸质，2-3片对生或轮生，卵形或椭圆形，叶缘有细锯齿且叶背具毛。圆锥绣球花大且美丽，花形奇特，长达30-40cm，花期7-10月，花期长，颜色可人。原产于日本及中国四川一带。从18世纪引入欧洲以来被广泛应用和研究，是一种高档花卉，但在国内还未普及。可种植于庭院中做花篱、花镜，也可将花球剪下，瓶插室内，具极高观赏价值。不仅如此，经相关研究表明圆锥绣球提取物还有一定的药用价值。圆锥绣球种子极微小，存在复杂休眠机制，由于用种子繁殖难度较大，大多采用扦插和压条等传统的繁殖方式，但繁殖系数不高。而组培技术是利用少量的外植体在人工配制的培养基上，给予适当培养条件从而获得大批优质苗的过程。

对于绣球离体培养方面的研究主要有：陆乙卜等(2015)报道了圆锥绣球种子离体萌发的培养条件，试验材料为野生圆锥绣球的种子，种子繁殖的苗木为实生苗，离体芽培养得到的是无性繁殖苗，所以组培方法不同。李奕萱等(2017)报道了大花木绣球组织培养体系，大花木绣球虽名为绣球，实则为忍冬科荚迷属植物，与圆锥绣球为不同科的植物；蒋梦烟(2017)报道了绣球品种‘蓝尼康’快繁技术研究，以茎尖为外植体，适宜的腋芽诱导培养基为MS+6-BA1.0mg/L，出芽率为92.5％，平均出芽个数为3.3个。适宜的生根培养基为MS+IBA1.0mg/L，平均生根时间为6.7d，生根长度为2.0cm。而‘蓝尼康’为大花绣球，在分类学上大花绣球与圆锥绣球为不同种，无论植株的表型特征还是生长特性、抗逆性等方面差异均较大。

关于圆锥绣球‘粉色精灵’的离体芽培养技术研究目前未见相关报道。

发明内容

发明目的：本发明目的是提供一种灭菌效果好、腋芽诱导率高、繁殖系数高、生根率高的圆锥绣球的离体芽培养方法。

技术方案：本发明提供一种圆锥绣球的离体芽培养方法，包括如下步骤：

(1)外植体的采集：于4-6月份，选取幼嫩带芽茎段作外植体，进行修剪，保留顶芽和腋芽；

(2)外植体消毒灭菌：外植体分别在洗衣粉中浸泡、流水下冲洗、多菌灵和链霉素混合液中浸泡、无菌水冲洗，后进行表面消毒：75％酒精浸泡、无菌水冲洗、HgCl₂溶液浸泡、无菌水冲洗；

(3)启动培养：将经过消毒灭菌的外植体两端切口处做修剪，剪成带芽茎段，直立式接种于启动培养基上；

(4)增殖培养：将经过启动培养的组培苗，剪成带芽茎段，减掉可接触到培养基的叶片，垂直接种于增殖培养基中；

(5)生根培养：增殖培养后，将组培苗基部进行修剪，转入生根培养基进行根的诱导。

进一步地，所述步骤(1)中的外植体取自粉色精灵品种。

进一步地，所述步骤(1)中的外植体为当年生幼嫩内膛枝。