[发明专利]一种絮凝酵母生物粘合剂及其制备和使用方法

权利要求书

1.一种絮凝酵母生物粘合剂，其特征在于，所述生物粘合剂包括蛋白质、多糖和絮凝酵母活细胞；其中，所述蛋白质含有贻贝蛋白多巴(Dopa)，所述絮凝酵母包括酿酒酵母S.cerevisiae SPSC01、酿酒酵母S.cerevisiae 6525Flol和酿酒酵母S.cerevisiae4126Flol中的一种或多种。

2.如权利要求1所述的一种絮凝酵母生物粘合剂，其特征在于，所述蛋白质中所述贻贝蛋白多巴(Dopa)的含量超过30％。

3.如权利要求1所述的一种絮凝酵母生物粘合剂，其特征在于，所述酿酒酵母S.cerevisiae 6525Flol是采用基因工程的手段将FLO-spsc基因导入絮凝酵母S.cerevisiae 6525(ATCC编号4006525)获得的；所述酿酒酵母S.cerevisiae 4126Flol是采用基因工程的手段将FLO-spsc基因导入絮凝酵母S.cerevisiae 4126(ATCC编号4004126)获得的。

4.如权利要求1所述的一种絮凝酵母生物粘合剂，其特征在于，所述生物粘合剂包括液态生物粘合剂和固态生物粘合剂。

5.如权利要求1～4所述的一种絮凝酵母生物粘合剂的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

步骤1)活化：取絮凝酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)冻存液接种到种子培养液中进行活化，获得活化絮凝酿酒酵母；

步骤2)培养：当步骤1)获得的所述活化絮凝酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)在细胞生长达到中后期时，转接至改良的发酵培养液中，在发酵罐中培养，得到培养絮凝酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)；

步骤3)收集：当步骤2)获得的所述培养絮凝酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的细胞达到生长中期时，收集所述发酵罐下层的所述絮凝酿酒酵母细胞，得到发酵絮凝酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)；

步骤4)混合：将步骤3)获得的所述发酵絮凝酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)，与Dopa含量丰富的蛋白质和多糖的溶液混合均匀，制成液态生物粘合剂；将步骤3)获得的所述发酵絮凝酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)，冷冻干燥得到细胞干粉，将所述细胞干粉与所述Dopa含量丰富的蛋白质和多糖的混合干粉混合均匀，制成固态生物粘合剂；其中所述絮细胞干粉与所述Dopa含量丰富的蛋白质和多糖的混合干粉的质量比1：20至1：50，所述混合干粉的成分为酵母膏、蛋白胨、葡萄糖、甘露糖和所述Dopa含量丰富的蛋白质。

6.如权利要求5所述的一种絮凝酵母生物粘合剂的制备方法，其特征在于，所述絮凝酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)包括酿酒酵母S.cerevisiae SPSC01、酿酒酵母S.cerevisiae 6525Flol和酿酒酵母S.cerevisiae 4126Flol中的一种或多种。

7.如权利要求5所述的一种絮凝酵母生物粘合剂的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中所述种子培养液是YPD种子培养液，其配方是质量百分比为1％的酵母膏、2％的蛋白胨和2％的葡萄糖；所述步骤3)中所述改良的发酵培养液配方是在所述YPD种子培养液的基础上额外添加所述Dopa含量丰富的蛋白质和甘露糖，其中所述Dopa蛋白的质量分数为0.1％-20％，甘露糖的质量分数为0.1％-10％。

8.如权利要求5所述的一种絮凝酵母生物粘合剂的制备方法，其特征在于，所述步骤4)中所述Dopa含量丰富的蛋白质中所述Dopa质量含量超过30％。