[发明专利]一种饮水免疫用兔球虫病减毒活疫苗助悬剂及其制备方法

说明书

本发明涉及免疫生物学领域，具体涉及一种饮水免疫用兔球虫病减毒活疫苗助悬剂及其制备方法。以质量百分数计，所述的饮水免疫用兔球虫病减毒活疫苗助悬剂含有0.3～0.6‰的卡拉胶和0.3～0.6‰的KCl。本发明中的助悬剂可使兔球虫卵囊在饮水中均匀悬浮，并保持8h不发生沉降，提高了兔摄入疫苗卵囊的均匀度，增加了免疫效果。而且，由于其尽量简化了助悬剂的组分，同时降低了组分的用量，可以最大程度地避免助悬剂对疫苗和兔可能造成的影响，且有利于降低生产成本。

技术领域

本发明涉及免疫生物学领域，具体涉及一种饮水免疫用兔球虫病减毒活疫苗助悬剂及其制备方法。

背景技术

兔球虫病是危害集约化养兔业最严重的传染病之一，其在家兔(Oryctolaguscuniculus)种群中感染率高，致病力强，对养兔业的危害极大，被列为国家二类动物疫病，与兔瘟、兔巴氏杆菌病、兔疥癣病同被列为四大兔病。该病的病原为兔艾美耳球虫(rabbitEimeria spp.)，其属于顶复门(Apicomplexa)，孢子虫纲(Sporozoa)，球虫亚纲(Coccidia)，真球虫目(Coccidiida)，艾美耳属(Eimeiria)。兔艾美耳属球虫种类繁多，已有25个种兔球虫被发现并命名。目前国际公认的为11种，我国主要流行种为肠艾美耳(Eimeria intestinalis)、大型艾美耳(Eimeria magna)、中型艾美耳(Eimeria media)等。该寄生虫一旦感染家兔就会寄生于宿主的消化系统上皮细胞，在其中完成有性生殖和无性生殖，在此过程中数量庞大的虫体会导致家兔消化系统上皮细胞的严重破坏，进而导致家兔饮食不振甚至废绝，体重降低，从而造成生产性能下降；严重时可造成兔群中个体的大量死亡，尤以幼兔为甚。家兔一旦耐过感染便会通过粪便不断向环境中排出未孢子化卵囊，在适宜的温度、湿度条件下，未孢子化卵囊会通过孢子生殖形成具有感染性的孢子化卵囊，该卵囊污染笼舍、水槽、料槽等设施，一旦被幼兔吞食便可造成感染，感染后的个体又可再次排出卵囊，进而感染其他个体，造成循环感染。该循环是兔球虫病不能得到有效控制的重要原因，即使长期使用抗球虫药的兔场，兔球虫的感染率仍居高不下。

对于兔球虫病目前仅能依靠药物防治，尚无疫苗的应用。而药物防治的弊端也日益凸显，如耐药虫株的出现，新药开发困难及不合理用药导致的食品安全等。这使得生产中对于疫苗的需求日益增加。

中国农业大学国家动物原虫实验室通过早熟压力选育法获得的三价球虫减毒活疫苗，经过实验室表明具有良好的安全性和有效性。在球虫活卵囊疫苗的应用中饮水法被认为是现阶段规模化养殖场对于球虫病免疫的最佳方法，但由于卵囊的比重大于水，在水中易造成沉降，使卵囊在饮水中的不均匀分布，最终造成群体的不均匀免疫，严重影响免疫效果。

同时，现有技术中虽然提到了较多关于鸡球虫病疫苗的助悬剂，但是，兔球虫与鸡球虫的卵囊大小存在较大的差异。比如，鸡球虫疫苗中，常见的柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫早熟株的卵囊平均大小分别为22μm×19μm、18μm×15μm、31μm×21μm、20μm×17μm。而在兔球虫病减毒活疫苗中大型艾美耳球虫卵囊平均大小为37.3μm×24.1μm，中型艾美耳球虫为25.4μm×15.3μm、肠艾美耳球虫为27μm×18μm。因此，将现有技术中应用于鸡的球虫疫苗助悬剂应用于兔球虫病减毒活疫苗时，会在悬浮稳定性上出现问题。此外，还需要考虑助悬剂对疫苗和动物机体可能造成的不利影响，更加难以将应用于鸡的球虫疫苗助悬剂直接应用于兔球虫病减毒活疫苗。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种可使兔球虫疫苗中卵囊成分在饮水中均匀分布，且价格低廉，应用简便，对兔体无毒无害的助悬剂及其制备方法与应用，为兔球虫病疫苗的开发、生产和应用提供有力保障。

为实现上述目的，本发明通过以下技术方案实现：

一种饮水免疫用兔球虫病减毒活疫苗助悬剂，以质量百分数计，含有0.3～0.6‰的卡拉胶和0.3～0.6‰的KCl。