[发明专利]载铂类药物/光敏剂的蛋白纳米粒及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及载铂类药物/光敏剂的蛋白纳米粒及其制备方法和应用，包括铂类药物/光敏剂配合物，以及包裹铂类药物/光敏剂配合物的蛋白质。将化学疗法和光动力疗法通过白蛋白纳米给药系统联合，以实现协同抗癌作用，达到减毒增效的治疗效果。本发明制备的纳米粒粒径较小、分散均匀、形态圆整，具有良好的化学稳定性、光照稳定性，在近红外光的照射下具有较高的活性氧产生能力，此外该纳米粒在细胞实验和动物实验中，验证了对肿瘤细胞具有较强的细胞毒性和良好的体内肿瘤靶向性，发挥协同增效的作用，降低毒副作用，实现了化学疗法和光动力疗法联合治疗肿瘤，并抑制肿瘤的转移。

技术领域

本发明涉及包载铂类药物和光敏剂的具有双重治疗效果的白蛋白纳米粒的制备，并作为抗肿瘤药新剂型，实现肿瘤的联合治疗，并抑制肿瘤的转移。

背景技术

恶性肿瘤是威胁人类健康的严重疾病，临床治疗中需要治疗和抑制转移并重。

目前作为纳米载药系统研究的材料多种多样，以生物大分子蛋白质为载体制备纳米材料，具有生物相容性好，安全无毒的优点，作为药物的载体材料可将药物选择性的靶向病变部位，有效降低其对正常组织的毒副作用，因此在纳米药物载体和抗肿瘤方面的药剂学研究中具有重要地位和研究价值。

白蛋白（Albumin）又称清蛋白，是血浆中含量最丰富的蛋白质。人血清白蛋白（Human Serum Albumin，HSA）是目前结构最清晰的白蛋白，分子量为66 kD。非糖基化的单链多肽包含585个氨基酸，等电点为4.7~4.9的酸性蛋白质，易溶于水，在血浆中其浓度为42g/L，约占血浆总蛋白的60%。

铂类药物的研究已有50多年历史。1965年，美国学者Rosenberg等偶然发现顺铂类配合物可以抑制细胞繁殖，能够用作抗肿瘤药物。此后，铂类药物迅速引起人们的关注，铂类抗肿瘤药物的研究也成为热点。时至今日，铂类药物的研究已发展到第四代，其中顺铂、卡铂和奥沙利铂已用于临床，合成这些铂类药物的重要前体为二水二氨合铂硝酸盐，故：二水二氨合铂离子亦称为顺铂前体离子。顺铂（又称顺-二氯二氨合铂，Cis-Dichlorodiammine platinum(II)，简称CDDP），作为经典的铂类抗肿瘤药物，在肿瘤化疗中占有重要地位。顺铂抗癌谱及其应用范围很广，临床主要用于治疗睾丸癌、卵巢癌、膀胱癌、头颈部癌、食管癌以及小细胞肺癌。当和阿霉素，紫杉醇，5-氟尿嘧啶（5-Fu）等联合用药时可治疗头颈部癌以及胃癌。但临床的大剂量和长期使用受限于其严重的毒副反应、低溶解性及耐药性。

肿瘤治疗中的光动力疗法（Photodynamic therapy, 简称PDT）是在肿瘤组织摄取光敏剂后，利用光动力反应进行疾病诊断与疾病治疗的新技术。PDT有3个重要因素：激发光源、光敏剂和活性氧。其作用机制为：光敏剂分子吸收相应波长光的光子能量，由基态变为单重激发态，激发态光敏剂分子可通过物理退激过程回到基态，并产生荧光用于临床诊断，即荧光诊断；也可转化为三重激发态，将能量转移给邻近的分子氧产生活性氧簇（Reactiveoxygen species, 简称ROS）诱导靶器官细胞发生自噬、凋亡与坏死。

由于“叶绿素a”的衍生物，在红光区域具有高消光系数和高单重态氧量子产率，所以已被广泛用作光敏剂。其中，PDT常用Ce6，它通过近红外光(NIR)光激活，能相对快速地从体内消除，以及具有高的活性氧产生效率，且Ce6还可用作NIR荧光成像，波长范围为650~900 nm，以避免内源性发色团在体内的干扰。但是，Ce6在生理条件下的稳定性差，且荧光量子产率（Φ_f）和光敏效果较差。因此，为增强光敏剂的稳定性和对肿瘤组织的靶向性，除开发新一代光敏剂外，为了提高PDT效率开发各类纳米载体为Ce6提供新平台，以及有效整合不同治疗方式，改善肿瘤治疗效果是非常必要的。

发明内容