[发明专利]马铃薯内生菌的具有抗病原活性的发酵有机物、其制备工艺、应用以及发酵产物

说明书

本发明涉及发酵技术领域，具体而言，涉及马铃薯内生菌的具有抗病原活性的发酵有机物、其制备工艺、应用以及发酵产物。该发酵有机物选自以下结构式所示化合物中的任意一种：和该有机物为首次利用马铃薯内生菌Trichotheciumcrotocinigenum得到的化合物，其为马铃薯内生菌制备得到的新化合物提供新的思路，扩大了马铃薯内生菌制备化合物的类型和范围。且制备该有机物的方法简洁，易于实施，可以大规模工业化生产。

技术领域

本发明涉及发酵技术领域，具体而言，涉及马铃薯内生菌的具有抗病原活性的发酵有机物、其制备工艺、应用以及发酵产物。

背景技术

内生菌是指在其生活史的一定阶段或全部阶段，生活于健康植物的各种组织和器官的细胞间隙或细胞内的细菌，可通过组织学方法或从严格表面消毒的植物组织中分离或从植物组织内直接产生扩增出微生物DNA的方法来证明其内生。现有技术对于马铃薯内生菌的研究一般是分离得到不同的内生菌，而后检测或者评价该内生菌对于植物的生长有何影响或者该内生菌有何作用，但是对内生菌的发酵产物或者发酵有机物的研究较少。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供马铃薯内生菌的具有抗病原活性的发酵有机物、其制备工艺、应用以及发酵产物。该发酵有机物为一种新的化合物，为马铃薯内生菌制备得到的新化合物提供新的思路，扩大了马铃薯内生菌制备化合物的类型和范围。

本发明是这样实现的：

第一方面，本发明实施例提供一种马铃薯内生菌的具有抗病原活性的发酵有机物，发酵有机物选自以下结构式所示化合物中的任意一种：

本发明提供的有机物为利用马铃薯内生菌Trichotheciumcrotocinigenum进行发酵，并对发酵产物进行后处理得到的化合物。

第二方面，本发明实施例提供一种马铃薯内生菌的具有抗病原活性的发酵有机物的制备工艺，包括利用马铃薯内生菌Trichotheciumcrotocinigenum的发酵产物进行后处理得到发酵有机物。

在较优地实施例中，后处理包括：对发酵产物进行液液分离，而后对液液分离得到的有机相依次进行硅胶柱分离、中压色谱分离和高压液相制备。液液分离可以是萃取或者其他现有可以进行分离的方式。

在较优地实施例中，后处理包括：利用乙酸乙酯对发酵产物进行萃取，而后对萃取液进行硅胶柱分离，接着对硅胶柱分离得到的第四个洗脱组合液进行中压色谱分离，而后对中压色谱分离得到的第二个洗脱组合液进行高压液相。

在较优地实施例中，硅胶柱分离的洗脱过程为：将氯仿和甲醇按浓度梯度为100:0、50:1、30:1、20:1、10:1以及5:1的比例进行洗脱，并收集每次洗脱得到的洗脱液，得到6种洗脱组合液。

需要说明的是，利用氯仿和甲醇进行梯度洗脱，是将氯仿和甲醇分别按照100:0、50:1、30:1、20:1、10:1以及5:1的体积比进行混合形成洗脱液，而后进行洗脱，且洗脱后收集对应浓度的洗脱液。即氯仿和甲醇按照体积比为100:0的比例混合形成的洗脱液，而后进行洗脱，并收集该洗脱液，作为第一个洗脱组合液，而后将氯仿和甲醇按照体积比为50:1的比例混合形成的洗脱液，而后进行洗脱，并收集该洗脱液，作为第二个洗脱组合液，而后将氯仿和甲醇按照不同体积进行混合，再洗脱，得到6个洗脱组合液。

下文的按浓度梯度洗脱与上述氯仿和甲醇进行梯度洗脱是相同的，都是将溶剂按照体积比进行混合形成洗脱液，而后进行洗脱，收集得到不同组分的洗脱组合液。

优选地，中压色谱分离的洗脱过程为：将甲醇和水按浓度梯度为10:90、20:80、30:70、40:60、50:50、60:40：70:30、80:20、90:10以及100:0的比例对硅胶柱分离得到的第四个洗脱组合液进行洗脱；也就是说中压色谱分离总共得到10个洗脱组合液。