[发明专利]一种双靶向乳腺癌细胞及其淋巴结转移灶的纳米颗粒、制备方法及应用

说明书

本发明提供了一种双靶向乳腺癌细胞及其淋巴结转移灶的纳米颗粒，属于生物科学和药物载体技术领域，所述纳米颗粒包括磷脂、胆固醇酯、近红外探针、透明质酸‑磷脂复合物和α螺旋多肽。该纳米颗粒能够有效标记乳腺癌细胞，并能够有效地靶向淋巴结，通过该纳米颗粒在不同状态淋巴结中光声显微成像信号分布的差异可将肿瘤转移的淋巴结与炎症性淋巴结和正常淋巴结进行区分，提升乳腺癌淋巴结转移鉴定的准确性。本发明还提供了一种双靶向乳腺癌细胞及其淋巴结转移灶的纳米颗粒制备方法及应用。

技术领域

本发明属于生物科学和药物载体技术领域，涉及一种双靶向乳腺癌细胞及其淋巴结转移灶的纳米颗粒、制备方法及应用。

背景技术

乳腺癌是女性最常被诊断出的癌症，也是导致女性癌症相关死亡率的主要原因。尽管目前已经在乳腺癌的诊断和治疗方面取得了非常大进步，但是对于转移性乳腺癌常被认为是很难治愈的。因此，为了在减轻疼痛和延长患者寿命的益处与治疗带来的伤害之间取得平衡，合理的治疗方案应基于肿瘤淋巴结转移的不同分期。而目前临床判定乳腺癌是否已经发生了转移所采用的手段主要是将含有放射性元素^99mTc标记的纳米胶体或者伊文斯蓝染料注射到原位乳腺癌周围，来标记前哨淋巴结并实施前哨淋巴结切除活检(SLNB)。但是实行淋巴结活检需要消耗大量的时间以及从某种程度上来说对活检的组织进行分析带有一定的主观性。另外，有报道前哨淋巴结的切除会引起一系列的并发症，比如淋巴水肿，肩关节功能障碍以及手臂麻木等问题。因此，开发一种在术中准确识别淋巴结肿瘤转移的新方法将有助于外科医生选择效果更合适地治疗方案，并能最大程度地减少因不必要的前哨淋巴结切除而引起的并发症。

肿瘤细胞浸润和炎症刺激条件下，都可能导致淋巴结发生肿大。目前已经开发了多种纳米探针用于快速预测前哨淋巴结肿瘤转移的状态，比如包括使用靶向性的荧光成像、微泡增强的超声成像、纳米颗粒增强磁共振成像(MRI)、表面增强拉曼散射(SERS)成像以及光声成像等。这些方法主要依赖于淋巴结中的巨噬细胞摄取纳米探针将信号减弱的肿瘤前哨淋巴结与信号增强的炎症性淋巴结区别开来。但是这很难检测到被肿瘤细胞完全占据的前哨淋巴结，因此使用这种间接的方式来预测乳腺癌肿瘤转移前哨淋巴结并不是最理想的方法。迫切需要发展基于转移性乳腺癌肿瘤本身的特征来开发新的工具，以将肿瘤转移的前哨淋巴结与炎症性淋巴结进行有效地区分。

发明内容

为了解决现有乳腺癌淋巴结转移鉴定可靠性低的技术问题，本发明提供了一种双靶向乳腺癌细胞及其淋巴结转移灶的纳米颗粒，该纳米颗粒能够高效标记乳腺癌细胞，并能够有效的靶向淋巴结，通过该纳米颗粒在不同状态淋巴结中光声显微成像信号分布的差异，可将肿瘤转移的淋巴结与炎症性淋巴结和正常淋巴结进行区分，提升乳腺癌淋巴结转移鉴定的准确性。

本发明还提供了一种双靶向乳腺癌细胞及其淋巴结转移灶的纳米颗粒制备方法及应用。

本发明通过以下技术方案实现：

一种双靶向乳腺癌细胞及其淋巴结转移灶的纳米颗粒，所述纳米颗粒包括磷脂、胆固醇酯、近红外探针、透明质酸-磷脂复合物和α螺旋多肽。

进一步的，所述磷脂包括DMPC和DSPE-PEG2000，所述透明质酸-磷脂复合物中的磷脂为DMPE，所述α螺旋多肽与磷脂相互作用，所述近红外探针为任意具有荧光/光声成像特性的脂溶性的光学探针或者水溶性的光学探针。

进一步的，所述脂溶性的光学探针为DiR-BOA，所述水溶性的光学探针为ICG。

进一步的，所述透明质酸为任意分子量大小的透明质酸。

进一步的，所述α螺旋多肽为具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列或包含SEQ IDNO.1的氨基酸序列。

为了便于说明，本发明将所述纳米粒子命名为α-HA-NP，α螺旋多肽命名为R4F，其氨基酸序列为FAEKFKEAVKDYFAKFWD或含有FAEKFKEAVKDYFAKFWD的序列。