[发明专利]一种果糖胺测定试剂盒

说明书

本发明公开了一种果糖胺测定试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，其中R1试剂pH为10.0～10.8，包括：200～500mmol/L碱性缓冲液、1～10g/L金属盐、0.5～2g/L Emulgen A90和Emulgen B66等体积比混合物、0.5～2g/L防腐剂；R2试剂pH为4.0～5.0，包括：5mmol/L～25mmol/L酸性缓冲液、0.5～2g/L异丙胺烷基苯磺酸盐；1～5g/L NBT以及0.5～2g/L防腐剂。本发明通过在R1试剂中特殊选取Emulgen A90和Emulgen B66的等体积比混合物，与强碱性环境配合，以有效清除血清样本中的干扰物；并且在R2试剂中将酸性环境与异丙胺烷基苯磺酸盐配合使用，并适当降低其中缓冲液的浓度，以增强NBT的溶解度和试剂稳定性，同时提高了试剂的精密度和线性范围，从而得到了一种抗干扰能力和稳定性显著增强，且试剂的线性和精密度也更优异的果糖胺测定试剂盒。

技术领域

本发明属于临床化学检测技术领域，具体涉及一种果糖胺测定试剂盒。

背景技术

果糖胺是血浆中的蛋白质在葡萄糖非酶糖化过程中形成的一种物质，它的浓度与血糖水平成正相关，并相对保持稳定，并且果糖胺的测定不受血糖的影响。由于血浆蛋白的半衰期为17～20天，故果糖胺可以反映糖尿病患者检测前1～3周内的平均血糖水平。从一定程度上弥补了糖化血红蛋白不能反映较短时期内血糖浓度变化的不足，是临床糖尿病人较长时间血糖控制水平的研究指标。

果糖胺的测定方法有多种，主要是化学法和层析法。其中化学法包括硫代巴比妥酸法和硝基四氮唑蓝(NBT)法等，而目前应用最广的方法是NBT法，即在碱性条件下，样品中的果糖胺能与NBT起显色反应，其颜色深浅与果糖胺含量成正比。如专利CN101135688A公开了血清中果糖胺NBT测定方法，包括R1试剂和R2试剂，其中R1包括NBT反应成分，pH为中性，R2为碱性碳酸钾缓冲液。

然而在检测过程中，血清样本中会存在抗坏血酸、胆红素、胆固醇等还原性物质的干扰，从而影响果糖胺检测结果的准确性，而仅依赖强碱性环境难以有效解决所有干扰问题；其次NBT的溶解性较差，因此试剂长期放置的过程中会出现底物析出的现象，从而影响了检测试剂的稳定性和检测准确性。

发明内容

本发明的目的提供一种果糖胺测定试剂盒，分别对R1试剂和R2试剂进行优化，通过特殊选取Emulgen A90和Emulgen B66的等体积比混合物，与强碱性环境配合，可有效去除样本中还原性物质的干扰；同时适当降低R2试剂的pH值，并加入具有增溶稳定作用的异丙胺烷基苯磺酸盐，以促进NBT的溶解，从而得到一种抗干扰能力和稳定性显著增强，并且试剂的线性和精密度也更优异的果糖胺测定试剂盒。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种果糖胺测定试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，其中所述R1试剂的pH为10.0～10.8，包括：

所述R2试剂的pH为4.0～5.0，包括：

本技术方案的原理是：首先对用于处理血清样本的R1试剂进行优化，在强碱性环境的基础上，特殊选取了Emulgen A90和Emulgen B66的等体积比混合物，与强碱性环境配合使用，以有效清除血清样本中胆固醇类、抗坏血酸等还原性物质的干扰，从而显著提高试剂的抗干扰能力；同时R2试剂中通过酸性环境和异丙胺烷基苯磺酸盐配合使用，以有效增强NBT的溶解性和稳定性，同时还可进一步提高试剂的精密度和线性。并且为避免R1、R2试剂混合后，R2试剂的低pH影响果糖胺与NBT反应所需的碱性环境，因此适当降低了R2试剂中缓冲液的浓度，从而得到了上述R1试剂和R2试剂的配方。

优选地，所述R1试剂的pH为10.5，包括：

所述R2试剂的pH为4.5，包括：