[发明专利]一种定量检测人消化道内短链脂肪酸的方法

权利要求书

1.一种定量检测人消化道内短链脂肪酸的方法,其特征在于,包括以下步骤：

步骤1：采用GC检测的方法对不同浓度短链脂肪酸标准品溶液进行测定，记录八种短链脂肪酸标准品溶液的色谱图和峰面积，进行线性回归分析，绘制得到各自的标准曲线；

步骤2：在粪便悬液中分别加入高、中、低三个浓度的短链脂肪酸标准品溶液得到各个浓度的混合溶液，将所述混合溶液按照净化提取方法进行净化提取后进行GC检测；

步骤3：对步骤2进行重复操作，记录并计算平均值，计算日内相对误差即为日内变异系数；计算平均值和相对误差，得到日间变异系数；准确度和精密度分别用回收率和变异系数来表示；回收率采用单点校准法计算，公式如下：

公式中：X表示回收率；A表示峰面积；V表示待测提取液吹干后定容体积，单位是mL；As表示短链脂肪酸标准品溶液的峰面积；W表示检测的混合溶液体积，单位是mL；

步骤4：将粪便悬液按照净化提取方法进行净化提取后进行GC检测，记录色谱图和峰面积，并以步骤2所得的线性回归方程分别计算出不同时间点取样所得粪便悬液中八种脂肪酸的含量。

2.根据权利要求1所述一种定量检测人消化道内短链脂肪酸的方法，其特征在于：步骤1包括选取7份不同浓度的短链脂肪酸标准品溶液进行测定。

3.根据权利要求1所述一种定量检测人消化道内短链脂肪酸的方法，其特征在于：步骤3包括：

步骤31：同一天对步骤2进行重复操作5次，取平均值，计算日内相对误差即为日内变异系数；

步骤32：对步骤31进行重复操作5天，计算平均值和相对误差，得到日间变异系数。

4.根据权利要求1所述一种定量检测人消化道内短链脂肪酸的方法，其特征在于：所述GC检测的条件如下：

色谱柱：DB-FFAP 125-3237，30m×0.53mm×0.50um；

载气采用高纯氮气N₂，气体流速为14.4mL/min；

进样口采用分流进样，进样时间为1.0min，温度为200℃；

检测器：FID检测器，温度240℃；

流速：H2 30mL/min，空气300mL/min；

尾吹气采用N2，流速为20mL/min

进样量为1μL；

升温程序方案为：温度为100℃时，升温速率是0℃/min，保留时间1min；

温度为180℃时，升温速率是8℃/min，保留时间1min；温度为200℃时，升温速率是20℃/min，保留时间2min。

5.根据权利要求1所述一种定量检测人消化道内短链脂肪酸的方法，其特征在于：所述净化提取方法为向粪便悬液中加6mol/L的盐酸从而将PH值调整为2-3，室温条件下进行涡旋震荡10min，5000r/min离心20min，取上清液。