[发明专利]检测血液中雷帕霉素含量的方法

权利要求书

1.检测血液中雷帕霉素含量的方法，其特征在于，包括：

利用高效液相色谱串联质谱仪，在一定检测条件下，分别检测至少三个标准溶液，得到各个标准溶液的色谱图，其中，任一标准溶液中均含有浓度已知的雷帕霉素标准品及内标物，不同标准溶液中雷帕霉素标准品的浓度不同；

根据各个标准溶液的色谱图，拟合得到雷帕霉素的标准曲线方程；

将一定量的内标工作液和一定量的血液样本混匀，加入一定量的硫酸锌水溶液并混匀，再加入一定量的乙腈并混匀，离心取上清液得到待测样本，其中，内标工作液中含有浓度已知的内标物；

利用高效液相色谱串联质谱仪，在相同检测条件下检测待测样本，得到待测样本的色谱图；

根据待测样本的色谱图和雷帕霉素的标准曲线方程，计算血液样本中雷帕霉素的含量；

其中，所述检测条件中的液相条件包括：Waters XBridge C18色谱柱，色谱柱的长度为100mm、内径为2.1mm、填料粒径为5μm，流动相A为甲醇，流动相B为含5-10mmol/L乙酸铵和0.1-0.2％甲酸的水溶液，洗脱过程采用梯度洗脱的方式，分析时间为2.8-3.5min，柱温为30-45℃，流速为0.2-0.4mL/min，进样量为5-15μL。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，

流动相B为含5mmol/L乙酸铵和0.1％甲酸的水溶液，分析时间为3min，柱温为40℃，流速为0.4mL/min，进样量为10μL。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，

所述洗脱过程包括：

时间(min)	流动相A(％)	流动相B(％)
初始	60-80	40-20
0.0	90-100	10-0
0.9	90-100	10-0
0.91	60-80	40-20
3.0	60-80	40-20

。