[发明专利]用于甘蓝自交不亲和系Ⅰ类S单元型筛选的PCR标记及引物有效
| 申请号： | 202010721067.X | 申请日： | 2020-07-24 |
| 公开（公告）号： | CN111705157B | 公开（公告）日： | 2022-11-29 |
| 发明（设计）人： | 张扬勇;陈文迪;方智远;杨丽梅;庄木;吕红豪;王勇;季家磊 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人： | 吴泳历;刘丹 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 甘蓝 亲和 单元 筛选 pcr 标记 引物 | ||
【权利要求书】：
1.用于甘蓝自交不亲和系Ⅰ类S单元型筛选的方法，包括如下步骤：
（1）提取待测甘蓝材料的基因组DNA；
（2）以所述基因组DNA为模板，采用引物进行PCR反应，获得PCR产物；所述引物的核苷酸序列为：
上游引物PKC6F：5’-CAATTTCACAGAGAATAGTGA-3’，
下游引物PKC6R：5’-ACCATTCCGGATATCCGCATTT-3’；
（3）使用琼脂糖凝胶电泳检测所述PCR产物，若所述PCR产物中出现472～475bp的特征条带，则所述待测甘蓝材料中含有Ⅰ类S单元型。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述PCR反应的体系为：10μmol/L上游引物0.5μL，10μmol/L下游引物0.5μL，2× PCR SuperMix 5μL，模板DNA 2μL，ddH2O 2μL。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述PCR反应的程序为：94℃预变性5min；94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸45s，33个循环；72℃延伸5min。
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