[发明专利]基于连续采血的中国鲎血液质量监测方法

说明书

一种基于连续采血的中国鲎血液质量监测方法，该方法将中国鲎血液中铜元素含量、血细胞数、血浆蛋白含量、血淋巴蛋白含量作为监测中国鲎的血液质量指标，通过检测中国鲎血液中铜元素含量并计算出上述其他指标，来监测中国鲎血液的质量，其监测方法包括取得样品、样品处理、检测样品中Cu元素含量、计算结果、等确定中国鲎血液质量健康标准步骤。该方法简便、高效、快捷、省时、省力、省钱，本发明中国鲎血液质量的采血量仅为1‑3ml，一旦在生产上实施，即可减少不当采血对中国鲎健康造成的影响，对中国鲎的利用与保护具有重要意义。

技术领域

本发明涉及一种甲壳类海洋动物的血液质量监测方法，特别是涉及一种基于连续采血的中国鲎血液质量监测方法，属于海洋药用资源开发与利用领域。

背景技术

世界上现在仅存4种鲎，分别为美洲东海岸的美洲鲎(Limulus polyphemus)、亚洲地区的中国鲎(Tachypleus tridentatus)(也称三棘鲎、中华鲎、东方鲎)、南方鲎(Tachypleus gigas)和圆尾鲎(Carcinoscorpius rotundicauda)。在这4种鲎中，只有中国鲎和美洲鲎可以生产鲎试剂，所以按来源鲎试剂可分为两种，一种是中国鲎试剂(Tachypleus Amebocyte Lysate，缩写为 TAL)，原材料为中国鲎血液; 另一种是美洲鲎试剂( Limulus Amebocyte Lysate，缩写为 LAL)，提取自美洲鲎的血液。中国鲎是世界上体形最大、最适合生产鲎试剂的鲎。因此，中国鲎是我国生产鲎试剂重要的海洋药用生物资源。

北部湾是世界上仅存的拥有中国鲎数量最大的地区，是中国鲎最重要的栖息地，但由于从20世纪80年代开始中国大规模生产鲎试剂，中国鲎的数量便开始急剧下降。生产鲎试剂过程中不科学的采血方式，使中国鲎面临着巨大的威胁，采血不规范、放生保护措施不到位、过度取血，甚至直接把鲎血抽干，这些杀鸡取卵式的采血方法造成很多被采血的中国鲎难逃一死，导致中国鲎的种群数量持续下降。根据广西北部湾海洋生物多样性养护重点实验室的调查，目前，广西北部湾海域成年的中国鲎数量仅为1万对左右，资源几近枯竭。2019年3月，中国鲎在世界自然保护联盟（IUCN）红色名录里的等级从原本的数据缺乏（DD）更新为濒危（EN）。

如果继续按照传统的采血方式生产鲎试剂，势必会造成中国鲎数量持续下降，甚至在短时间内中国鲎将消耗殆尽。如果不继续从野外捕捉中国鲎采血生产鲎试剂，我国的鲎试剂（TAL）产业，将会因为没有原料而无以为继。因此，作为濒危物种，中国鲎的保护必将进入到新的历史阶段。但是，面对巨大的市场需求，如何科学利用中国鲎资源则显得尤为重要。

科学利用中国鲎资源就是要改变传统的中国鲎采血方式，如果我们在人工养殖条件下开展可持续性抽血，即把在自然海域捕获的中国鲎驯养在池塘中，然后定期定量对鲎进行抽血，并确保鲎的成活率，提高鲎的利用率，实现可持续性多次抽血，从而减少中国鲎的捕获量。鲎的寿命通常可以达到60岁，如果实现可持续抽血，估计一只鲎的抽血量至少要达到传统抽血方式的20-30倍。这样，在当前的鲎试剂生产规模下，可以确保中国鲎的种群数量不再减少。

但是，由于中国鲎在养殖与采血过程中会受到气候、水质、摄食等多种因素的影响，血液的再生与恢复并非总是一样的，如果采血以后的中国鲎的血液质量没有得到很好的恢复而继续按照原来的计划定期定量采血，势必直接影响到中国鲎的健康甚至造成其死亡。因此，建立基于连续采血的中国鲎血液质量监测方法，是科学利用中国鲎资源的一项重要的技术。