[发明专利]一种四季抗病毒合剂成分含量测定方法

说明书

本发明提供一种四季抗病毒合剂成分含量测定方法。所述四季抗病毒合剂成分含量测定方法包括以下步骤：第一步：色谱准备；第二步：对照品溶液制备；第三步：供试品溶液制备；第四步：分别制备缺连翘药材的制剂、缺甘草药材的制剂、缺紫苏叶药材的制剂、缺菊花和鱼腥草药材的制剂、缺菊花，鱼腥草，薄荷药材的制剂、缺紫苏叶、荆芥和芦根的制剂；第五步：方法学考察。本发明提供的四季抗病毒合剂成分含量测定方法，利用超快速液相色谱法对四季抗病毒合剂中17种成分进行含量测定，所用色谱条件具有良好的精密度、重复性，方法加样回收率良好，所用四季抗病毒合剂具有良好的稳定性，为四季抗病毒合剂建立了多成分定量方法。

技术领域

本发明涉及四季抗病毒合剂技术领域，具体为一种四季抗病毒合剂成分含量测定方法。

背景技术

四季抗病毒合剂由鱼腥草、桔梗、桑叶、连翘、荆芥、薄荷、紫苏叶、苦杏仁、芦根、菊花、甘草11味中药组成。具有清热解毒、消炎退热的功能，用于上呼吸道感染、病毒性感冒、流感、腮腺炎等病毒性感染性疾病的治疗，临床主要用于对小儿呼吸系统感染、手足口病等的治疗，对小儿呼吸道病毒性感染效果尤其显著。

目前市面上对四季抗病毒合剂中成分含量进行测定的方法，不具备良好的精密度、重复性。

发明内容

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种四季抗病毒合剂成分含量测定方法，解决了目前市面上对四季抗病毒合剂中成分含量进行测定的方法，不具备良好的精密度、重复性的问题。

(二)技术方案

为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种四季抗病毒合剂成分含量测定方法，包括以下步骤：

第一步：色谱准备：KromasilC18柱；以乙腈－0.085％磷酸水溶液为流动相，按以下梯度进行洗脱：0～30min，B98％→70％；30～45min，B70％→55％；45～60min，B55％→39％。检测波长记：277nm，254nm；记录时间为60min；流速：0.8ml·min－1；柱温：30℃；进样量：5μl；

第二步：对照品溶液制备：分别精密称取新绿原酸6.9mg、绿原酸4.8mg、咖啡酸10.0mg、1,3-O-二咖啡酰奎宁酸11.0mg、连翘酯苷B16.6mg、连翘酯苷A18.0mg、异槲皮苷22.0mg、甘草苷6.4mg、阿魏酸6.9mg、橙皮苷0.8mg、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸9.8mg、迷迭香酸4.4mg、连翘苷6.1mg、蒙花苷4.1mg、槲皮素11.2mg、甘草酸6.5mg于10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即为对照品溶液，浓度分别为0.68mg·ml-1、0.48mg·ml-1、1.00mg·ml-1、1.04mg·ml-1、1.60mg·ml-1、1.68mg·ml-1、2.04mg·ml-1、0.6mg·ml-1、0.68mg·ml-1、0.08mg·ml-1、0.96mg·ml-1、0.40mg·ml-1、0.58mg·ml-1、0.40mg·ml-1、1.12mg·ml-1、0.60mg·ml-1，精密吸取紫苏醛10.6μl于10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即为紫苏醛对照品溶液，浓度为1.00μl·ml-1；

第三步：供试品溶液制备：取四季抗病毒合剂，精密量取1.0ml，置于5ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，用0.45μm滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；

第四步：分别制备缺连翘药材的制剂、缺甘草药材的制剂、缺紫苏叶药材的制剂、缺菊花和鱼腥草药材的制剂、缺菊花，鱼腥草，薄荷药材的制剂、缺紫苏叶、荆芥和芦根的制剂，再根据第三步分别制备缺连翘阴性对照溶液、缺甘草阴性对照溶液、缺紫苏叶阴性对照溶液、缺菊花和鱼腥草阴性对照溶液、缺菊花、鱼腥草和薄荷的阴性对照溶液、缺紫苏叶、荆芥和芦根阴性对照溶液；