[发明专利]一株产生物表面活性剂的贝莱斯芽孢杆菌MMB-51及其应用

说明书

本发明公开了一株产生物表面活性剂的贝莱斯芽孢杆菌MMB‑51及其应用，其分类命名为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis MMB‑51，保藏编号为CGMCC No.19099，制备叶面肥增效剂的步骤是：将菌种接种于种子液培养基中，180rpm，37℃摇床培养12‑16h获得种子液；将种子液按1％(v/v)的比例转接到发酵培养基中，180rpm，37℃摇床培养36‑48h获得发酵液；离心，收集上清液；向上清液中加入适量HCl使得上清液pH＝2.0，混匀，4℃条件下静置过夜，然后在4℃的条件下离心，收集沉淀，去除上清液，使用1M NaOH溶液将沉淀残留液体调节至中性，用冷冻干燥后得到生物表面活性剂产品；将生物表面活性剂产品溶解于水中，配制成溶液，作为叶面肥增效剂。

技术领域

本发明涉及农业微生物技术领域，具体涉及一株产生物表面活性剂的贝莱斯芽孢杆菌MMB-51及其应用。

背景技术

生物表面活性剂是指微生物在发酵生长过程中分泌的具有一定表面活性的代谢产物，是一种可生物降解的表面活性成分，具有表面活性剂所共有的性能，如增溶、乳化、分散、降低表面张力等。与化学合成的表面活性剂相比，生物表面活性剂还具有安全性好，无毒无害、表面活性高等优点，与人体和环境相容性好，广泛用于洗涤剂，石油开采，化妆品等领域。

表面活性剂可以通过化学合成和微生物发酵的方法进行生产，其中化学合成法所需的反应步骤较多且具有毒性高，生物难降解等缺点；因此近年来，微生物发酵生产生物表面活性剂在国内外研究中受到越来越多的重视。生物表面活性剂根据其结构的不同可以分为脂肽和脂蛋白类、糖脂类、磷脂类、中性脂类以及多聚物类。自然界中有很多种微生物能够通过发酵代谢产生表面活性物质，主要包括假单胞菌(Pseudomonas sp.)、芽孢杆菌(Bacillus sp.)、节杆菌(Arthrobacter sp.)、分支杆菌(Mycobacterium sp.)和丁酸梭菌(Clostridium tyrobutyricum)等。其中假单胞菌和芽孢杆菌是目前报道较多的，前者主要产生鼠李糖脂类生物表面活性剂；而后者主要产生脂肽类生物表面活性剂，两者都表现出良好的表面活性和应用前景。从环境样品中分离筛选的生物表面活性剂的产生菌的生物表面活性剂产量普遍较低，且生物表面活性剂产生后部分与产生菌的菌体相结合，增加了提取难度，同时影响生物表面活性剂的提取纯度。产量低和提取工艺复杂导致生物表面活性剂价格相对较高，限制了生物表面活性剂的应用范围。为降低生物表面活性剂的生产成本，目前的研究主要集中在选育高产菌株、构建高产基因工程菌、优化发酵条件和工艺参数，以及改善提取工艺等方面来提高生物表面活性剂的产量和质量，但目前真正产业化应用的菌株较少，筛选高产功能菌株和扩大生物表面活性剂的应用范围仍是该领域的重点研究工作之一。

我国是农业大国，施用化肥和农药是保证粮食高产的一种重要手段，农药和化肥对我国粮食产量的贡献率达到40％～60％，因此其对农业的重要性不言而喻。叶面肥是以植物的叶面吸收为目的，将农作物所需要的养分直接施用于叶面的肥料，叶面肥具有吸收快，作用强和效率高等优点，可以作为植物根部施肥的重要补充。叶面肥多以液体方式将营养元素喷施用于农作物叶片表面，通过叶片表面的气孔进入叶内，促进叶片吸收养分、发挥促生增产等功能。增加单位叶面肥液体量与叶面的接触面积或提高叶面肥液体在叶面的粘附力是提高叶面肥施用效率，减少叶面肥的用量的有效途径，然而目前对叶面肥增效剂的研究却极少。

发明内容

本发明的目的之一是提供一株产生物表面活性剂的贝莱斯芽孢杆菌 MMB-51。

本发明的目的之二是提供上述产生物表面活性剂的贝莱斯芽孢杆菌 MMB-51在制备叶面肥增效剂中的应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：一种株产生物表面活性剂的贝莱斯芽孢杆菌MMB-51，其分类命名为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis MMB-51，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：中国北京，保藏日期为 2019年12月5日，保藏编号为CGMCC No.19099。