[发明专利]一种包埋脱氮硫杆菌的固定化颗粒的制备方法和应用

权利要求书

1.一种包埋脱氮硫杆菌的固定化颗粒制备方法，其特征在于：其包括以下步骤，

（1）将脱氮硫杆菌接种到水性培养基中培养，得到脱氮硫杆菌的水溶液，得到的脱氮硫杆菌的水溶液中脱氮硫杆菌的浓度大于10⁸CFU/ml，然后离心得到湿菌体；

（2）将牡蛎壳研磨至40-60目，然后灭菌后得到牡蛎粉；

（3）将步骤（1）得到的湿菌体和步骤（2）得到的牡蛎粉混合，吸附10-20min，得到包埋体；

（4）将聚乙烯醇溶于水，加热成为黏稠液体，得到包埋剂溶液；然后将所述包埋剂溶液冷却至25-35℃，加入硫磺，得到包埋剂；然后将包埋剂灭菌后冷却至室温，获得包埋溶液；

（5）将步骤（3）得到的包埋体和步骤（4）得到的包埋溶液混合均匀后，滴加到交联剂中反应，直到凝固成球形且粒径为2-4mm的胶状物;

（6）将步骤（5）得到的胶状物用去离子水洗涤后，在-20℃下冷冻保存24-48h，冷冻期间解冻风干1-2次，最后解冻得到包埋脱氮硫杆菌的固定化颗粒。

2.根据权利要求1所述的一种包埋脱氮硫杆菌的固定化颗粒的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，将脱氮硫杆菌接种培养基中，脱氮硫杆菌的接种量为10%，调节所述培养基的pH到7.0，121℃下灭菌30min，控温28-32℃，培养12-24h，得到的脱氮硫杆菌的水溶液中脱氮硫杆菌的浓度大于10⁸CFU/ml，最后离心得到湿菌体；

所述培养基包括以下重量份的组分，去离子水1000份，五水合硫代硫酸钠5-6份，硝酸钾2-3份，碳酸氢钠1-2份，磷酸二氢钾1-2份，六水合氯化镁0.5-1 份。

3.根据权利要求1所述的一种包埋脱氮硫杆菌的固定化颗粒的制备方法，其特征在于：步骤（2）中，将牡蛎壳先在水中冲洗去除泥沙，然后在水中浸泡，浸泡时间为48-72h，浸泡完成后捞出后在95-105℃下烘干，然后用质量分数为2-5%的盐酸将牡蛎壳表面清洗干净，最后，用蒸馏水将牡蛎壳表面的残余盐酸洗净；洗净后将牡蛎壳研磨粉碎成40-60目，然后在200℃下烘干；

步骤（2）中，灭菌为将在紫外灯下照射20min。

4.根据权利要求1所述的一种包埋脱氮硫杆菌固定化颗粒的制备方法，其特征在于：步骤（4）中聚乙烯醇溶于水后，聚乙烯醇的质量分数为7.5%-10%。

5.根据权利要求1所述的一种包埋脱氮硫杆菌固定化颗粒的制备方法，其特征在于：步骤（4）中，聚乙烯醇溶于水后，在80-110℃加热5-10min后成为黏稠液体，得到包埋剂溶液；

所述硫磺过18 ~ 60目筛，获得 0.25 ~ 1.00 mm 粒径的硫磺颗粒，将所述包埋剂溶液冷却至25-35℃，加入所述硫磺颗粒，得到包埋剂，然后将包埋剂在121 ℃,0.12MPa灭菌20min后冷却至室温，获得包埋溶液。

6.根据权利要求1所述的一种包埋脱氮硫杆菌固定化颗粒的制备方法，其特征在于：步骤（5）中，所述交联剂为饱和硼酸溶液，将交联剂的pH值调为6.7-7.0，然后将步骤（3）得到的包埋体和步骤（4）得到的包埋溶液混合均匀后滴加到调节好pH值的交联剂中，在交联剂中反应24-36h，得到凝固成球形且粒径为2-4mm的胶状物。

7.根据权利要求6所述的一种包埋脱氮硫杆菌固定化颗粒的制备方法，其特征在于：其特征在于：步骤（6）中，冷冻期间解冻温度为-1℃～3℃，每次风干时间为1-2h，最后在-1℃～3℃下解冻得到脱氮包埋固定化颗粒。

8.根据权利要求1所述的制备方法制得的包埋脱氮硫杆菌固定化颗粒，其特征在于：各组分的质量比为，湿菌体：牡蛎粉：包埋剂溶液：硫磺：交联剂=1-2：9-10：8-9：3-4：2-3。

9.根据权利要求1所述的制备方法制得的包埋脱氮硫杆菌固定化颗粒，其特征在于：步骤（1）中，离心机转速为3000-4000r/min，离心时间为5-8min。

10.权利要求1-9任一所述的制备方法得到的包埋脱氮硫杆菌固定化颗粒在低C/N废水中的应用。