[发明专利]从肺部穿刺组织中制备单细胞悬液的方法

权利要求书

1.一种从肺部穿刺组织中制备单细胞悬液的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)将肺部穿刺组织置于冰上剪碎；

2)加终浓度为0.2±0.05mg/ml的IV型胶原酶，37±0.3摄氏度下消化10-15min；

3)使用孔径40μm的细胞过滤网过滤，收集滤过液，离心富集细胞；

4)加入含BSA的PBS重悬细胞，离心富集细胞；

步骤4)中，所述含BSA的PBS，是在每100ml PBS的基础上添加4±0.05mg BSA得到。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3)之后，若滤过液有红细胞，则加入红细胞裂解液重悬细胞，冰上静置5±1min，离心富集细胞；若无红细胞，则直接进入步骤4)。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)中IV型胶原酶的终浓度为0.2mg/ml。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤4)中，含BSA的PBS，是在每100ml PBS的基础上添加4mg BSA得到。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3)和/或步骤4)中，离心条件是4摄氏度下400g离心6min。