[发明专利]一种流产衣原体的细胞培养方法及应用有效
| 申请号： | 202010729728.3 | 申请日： | 2020-07-27 |
| 公开（公告）号： | CN111662854B | 公开（公告）日： | 2022-02-11 |
| 发明（设计）人： | 周继章;李兆才;刘萍;刘东慧 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N5/077;C12N5/071;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 董大媛 |
| 地址： | 730000 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 流产 衣原体 细胞培养 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种流产衣原体的细胞培养方法，包括以下步骤：
将待感染细胞以每孔1×106个细胞的密度接种在6孔板上，培养过夜，使待感染细胞贴壁并长成单层；将长成单层的待感染细胞进行洗涤，得到洗涤后的细胞；
将流产衣原体接种液与DNA转染试剂Lipofectamine 2000混合，静置，接种到洗涤后的细胞上，孵育，吸弃孵育后液体，得到感染后的细胞；
感染后的细胞使用培养液继续培养48～72h；
所述待感染细胞包括小鼠成纤维细胞McCoy、小鼠成纤维细胞L929，小仓鼠肾细胞BHK-21或人宫颈癌细胞HeLa；
所述静置的时间为10min；
所述孵育的条件为37℃，30～60min。
2.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述流产衣原体接种液为含流产衣原体的无血清培养液，所述无血清培养液包括RPMI-1640。
3.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述DNA转染试剂Lipofectamine2000与流产衣原体接种液的体积比为1：(250～4000)。
4.DNA转染试剂Lipofectamine 2000在增强流产衣原体对权利要求1～3任一项所述细胞培养方法培养的细胞的感染能力中的应用。
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