[发明专利]一种特异性结合RANKL靶向治疗药物的抗体及其应用

说明书

本发明提供了一种特异性结合RANKL靶向治疗药物的抗体，所述抗体由2条相同的重链和2条相同的轻链组成，其中所述重链的可变区具有三个抗原决定簇区域，所述重链的可变区的抗原决定簇区域的氨基酸序列选自如SEQ ID NO.7‑SEQ ID NO.15所示的氨基酸序列；所述轻链的可变区具有三个抗原决定簇区域，所述轻链的可变区的抗原决定簇区域的氨基酸序列选自如SEQ ID NO.16‑SEQ ID NO.24所示的氨基酸序列。本发明的抗体能够与地舒单抗特异性结合，并且各抗体之间不存在竞争关系，从而有效、准确地检测血清中地舒单抗的浓度。

技术领域

本发明属于生物化学领域，具体涉及一种特异性结合RANKL靶向治疗药物(如地舒单抗和/或其类似物)的抗体、抗体组合及其应用。

背景技术

地舒单抗(Denosumab)是美国安进公司生产的用于抗骨质疏松和抗骨癌转移的单克隆抗体，该抗体可以特异性结合核因子-κB受体活化因子配体(Receptor activator ofnuclear factor kappa-B ligand，RANKL)，从而阻断RANKL与其膜受体RANK的结合，阻断RANKL-RANK在破骨细胞中的信号转导活化信号。

双抗体夹心法是指将一对已知抗原的非竞争性抗体依次与抗原结合，该抗原可以是蛋白、多肽或抗体，使得形成“抗体-待检测抗原-抗体”的“夹心”状态。当加入酶偶联的底物后，发生显示反应/信号变化，通过读取吸光值/信号变化来反应被检测的蛋白的浓度，所以被称为双抗体夹心法。双抗体夹心法如果用ELISA方法进行，则称为ELISA双抗体夹心法。在临床检验中，双抗体夹心法通常用于检验各种蛋白质、抗体等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。这种双位点夹心法具有很高的特异性和敏感性，通常可以达到ng级水平；而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应，作一步检测。

发明内容

本发明的目的在于针对以上要解决的技术问题，提供一种能够与RANKL靶向治疗药物特异性结合、从而有效并准确检测血清中RANKL靶向治疗药物浓度的抗体。

为实现上述目的，本发明提供了一种特异性结合RANKL靶向治疗药物的抗体，所述抗体由2条相同的重链和2条相同的轻链组成，其中所述重链的可变区具有三个抗原决定簇区域，所述重链的可变区的抗原决定簇区域的氨基酸序列选自如SEQ ID NO.7-SEQ IDNO.15所示的氨基酸序列；所述轻链的可变区具有三个抗原决定簇区域，所述轻链的可变区的抗原决定簇区域的氨基酸序列选自如SEQ ID NO.16-SEQ ID NO.24所示的氨基酸序列。

优选地，所述RANKL靶向治疗药物包括但不限于地舒单抗。

所述抗体优选是通过小鼠免疫方法得到的鼠源单克隆抗体。

优选地，所述重链的可变区的氨基酸序列选自如SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列，所述轻链的可变区的氨基酸序列选自如SEQ ID NO.4-SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列。

作为一种优选的实施方案，所述重链的可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述轻链的可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

作为一种优选的实施方案，所述重链的可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述轻链的可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。

作为一种优选的实施方案，所述重链的可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述轻链的可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。

另一方面，本发明还提供了一种试剂盒，其含有所述抗体中的一种或多种。优选地，该试剂盒还包括洗涤液、显色液、RANKL靶向治疗药物标准品和终止液。