[发明专利]一种基因组测序鉴定PGCs介导后代生成的方法

权利要求书

1.一种基因组测序鉴定PGCs介导后代生成的方法，其特征是，前期将诱导转分化形成的狼山鸡PGC-like细胞注射至孵化2.5天的白羽受体鸡胚血管，封口后继续孵化至出壳，记录后代鸡的表型性状，提取PGC-like细胞来源的后代鸡血液进行基因组测序；以正常的隐性白羽、狼山鸡作为对照，分析不同后代的来源；分析EGFP在后代鸡中的插入情况，同时分析后代中具有相似表型的个体基因组中的SNP分布的异同和基因组随机插入位点的异同；结果发现能够明确鉴定阳性后代的来源于狼山鸡CEF诱导转分化形成的PGC-like。

2.根据权利要求1所述的一种基因组测序鉴定PGCs介导后代生成的方法，其特征是，具体包括如下步骤：

1）CEF诱导转分化形成的PGC-like细胞移植产生后代；

2）证明父母代的印迹在后代同时出现；

3）羽色相似后代间的相关性分析；

4）不同羽色个体间羽色相关基因的变异分析。

3.根据权利要求2所述的一种基因组测序鉴定PGCs介导后代生成的方法，其特征是，步骤2）中，包括：

①对现有的狼山鸡群和隐性白羽鸡群进行翅静脉采血，提取基因组DNA，基因组测序；在GenBank数据库中筛选合适的SSR，并通过毛细血管测序证明双亲SSR在后代中出现种系传递；

②设计微卫星指纹的特异性引物，对现有的狼山鸡群和隐性白羽鸡群基因组DNA进行扩增。

4.根据权利要求3所述的一种基因组测序鉴定PGCs介导后代生成的方法，其特征是，步骤3）中，对后代鸡中的羽色相似的个体进行翅静脉采血，提取基因组DNA进行测序，通过测序数据分析毛色相似的个体之间的亲缘关系。

5.根据权利要求4所述的一种基因组测序鉴定PGCs介导后代生成的方法，其特征是，步骤4）中，通过基因组测序，系统筛选羽色相关基因黑色素皮质受体 1、酪氨酸酶、刺鼠相关蛋白的变异，通过测序数据分析不同羽色的个体之间的亲缘关系，分析是否是因为基因分离或是慢病毒载体的插入导致不同羽色性状的出现。