[发明专利]高粱芒的有无分子标记的开发和应用有效
申请号: | 202010737411.4 | 申请日: | 2020-07-28 |
公开(公告)号: | CN111826461B | 公开(公告)日: | 2022-05-31 |
发明(设计)人: | 白春明;陆晓春;朱振兴;王春语;王平;刘轶飞;李金红;丛玲;张丽霞;李丹;赵家铭 | 申请(专利权)人: | 辽宁省农业科学院 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 闫书宁 |
地址: | 110161 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高粱 有无 分子 标记 开发 应用 | ||
1.引物对组合,包括特异引物对1、特异引物对2和/或特异引物对3;
特异引物对1由引物Sbp01F和引物Sbp01R组成;引物Sbp01F的核苷酸序列如SEQ IDNO:1所示;引物Sbp01R的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示;
特异引物对2由引物Sbawn01F和引物Sbawn01R组成;引物Sbawn01F的核苷酸序列如SEQID NO:3所示;引物Sbawn01R的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示;
特异引物对3由引物Sb430F和引物Sb430R组成;引物Sb430F的核苷酸序列如SEQ IDNO:5所示;引物Sb430R的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示。
2.一种试剂盒,含有权利要求1所述引物对组合。
3.权利要求1所述引物对组合或权利要求2所述试剂盒的应用,为b1)-b4)中的任一种:
b1)鉴定或辅助鉴定待测高粱芒的有无;
b2)筛选或辅助筛选有芒或疑似有芒的高粱品种;
b3)筛选或辅助筛选无芒或疑似无芒的高粱品种;
b4)高粱育种。
4.DNA片段甲、DNA片段乙、DNA片段丙或DNA片段丁;
以待测高粱的基因组DNA为模板,采用权利要求1中所述特异引物对1扩增得到的DNA片段甲;所述DNA区段甲的核苷酸序列如SEQ ID NO:7所示;
以待测高粱的基因组DNA为模板,采用权利要求1中所述特异引物对2扩增得到的DNA片段乙;所述DNA区段乙的核苷酸序列如SEQ ID NO:8所示;
以待测高粱的基因组DNA为模板,采用权利要求1中所述特异引物对3扩增得到的DNA片段丙或DNA片段丁;所述DNA区段丙的核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示;所述DNA区段丁的核苷酸序列如SEQ ID NO:10所示。
5.权利要求4所述DNA片段甲、所述DNA片段乙、所述DNA片段丙或所述DNA片段丁的应用,为b1)-b9)中的任一种:
b1)鉴定或辅助鉴定待测高粱芒的有无;
b2)筛选或辅助筛选有芒或疑似有芒的高粱品种;
b3)筛选或辅助筛选无芒或疑似无芒的高粱品种;
b4)高粱育种;
b5)制备鉴定或辅助鉴定待测高粱芒的有无的产品;
b6)制备筛选或辅助筛选有芒或疑似有芒的高粱品种的产品;
b7)制备筛选或辅助筛选无芒或疑似无芒的高粱品种的产品;
b8)制备高粱育种的产品;
b9)作为鉴定或辅助鉴定待测高粱芒有无的分子标记。
6.c1)或c2);
c1)鉴定或辅助鉴定待测高粱芒有无的方法,包括如下步骤:
(c1-1)以待测高粱的基因组DNA为模板,采用权利要求1中所述特异引物对1进行PCR扩增,得到PCR扩增产物;
(c1-2)完成步骤(c1-1)后,进行如下判断:如果所述PCR扩增产物中具有DNA片段、待测高粱无芒或疑似无芒,如果所述PCR扩增产物中不具有DNA片段、待测高粱有芒或疑似有芒;
c2)鉴定或辅助鉴定待测高粱芒有无的方法,包括如下步骤:
(c2-1)检测待测高粱的基因组DNA中是否含有DNA区段甲;所述DNA区段甲的核苷酸序列如SEQ ID NO:7所示;
(c2-2)完成步骤(c2-1)后,进行如下判断:如果待测高粱的基因组DNA中含有DNA区段甲、待测高粱无芒或疑似无芒,如果待测高粱的基因组DNA中不含有DNA区段甲、待测高粱有芒或疑似有芒。
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