[发明专利]一种集约化生产槲蕨种苗的方法

权利要求书

1.一种槲蕨种苗集约化繁育方法，其包括以下步骤：

(1)制备混合基质：将泥炭藓、蛭石和细沙按体积比10：(1-3)：(1-5)混合，加水使基质含水量为40-50％，灭菌，得所述混合基质，装入穴盘待用；

(2)播种：将槲蕨孢子加水避光浸泡48-72小时，制备孢子悬液，按照200-800粒/cm²，优选400-500粒/cm²的播种量均匀播种至步骤(1)所述穴盘中混合基质的表面；

(3)培养：将步骤(2)播种后的穴盘置于温室潮汐苗床上进行培养，配子体成熟后将基质浸透水1次；其中，所述培养条件为：将苗床上方覆盖通风、透光且不易凝结水珠的材料；保持基质湿润；控制空气相对湿度80-100％，最低环境温度为12℃，最高环境温度为26℃；优选地，控制昼夜温差10℃以上。

2.权利要求1的方法，步骤(1)所述混合基质中泥炭藓、蛭石和细沙体积比为10：1：4；

优选地，所述泥炭藓为丹麦品氏托普泥炭藓，例如长度规格为0-6mm的泥炭藓；

优选地，所述蛭石粒径为12-24目(例如0.8-1.2mm)；

优选地，所述细沙粒径为70-180目；

优选地，所述灭菌为高压灭菌；优选的方法为：将所述基质置于高压灭菌锅于120-125℃，103-105Kpa处理40-50min，任选的，还包括将高压灭菌后的基质用50-200倍体积的50％灭蝇胺可溶性粉剂1000倍稀释液处理，密封存放12-48小时(例如24小时)的步骤。

3.权利要求1或2的方法，在步骤(1)中将所述混合基质装入穴盘后，还包括用经软化处理EC值小于60us/cm的水浸透的步骤；

优选地，在步骤(1)中将所述混合基质装入穴盘前，还包括将穴盘用0.5％高锰酸钾溶液浸泡15min-1h(例如30min)的步骤。

4.权利要1-3任一项的方法，其中步骤(2)中所述槲蕨孢子通过下述方法得到：收集成熟槲蕨孢子叶片，待孢子自然脱落，得到所述槲蕨孢子；任选地，收集成熟槲蕨孢子叶片后剪除叶片上部1/4；

优选地，于春天(例如3-4月)或秋天(例如8-9月)收集成熟槲蕨孢子叶片；

优选地，将收集得到的成熟槲蕨孢子叶片装入纸袋(例如硫酸纸袋)，置通风、阴凉处干燥使孢子自然脱落；

优选地，在得到所述槲蕨孢子后，还包括除固体杂质的步骤，例如过200目筛；

优选地，将所述槲蕨孢子在0-4℃(例如0℃)保存；优选密封保存。

5.权利要求1-4任一项的方法，步骤(2)中所述孢子悬液的浓度为0.1-1mg/ml(例如0.5mg/ml)。

6.权利要求1-5任一项的方法，在步骤(3)中，孢子萌发后每10-15天(例如每15天)喷施1次氮磷钾复合肥，例如2000倍稀释的花多多复合肥营养液，更优选2000倍稀释的花多多1号(20-20-20)复合肥营养液。

7.权利要求1-6任一项的方法，在配子体受精后至孢子体出现第一片真叶时，进行分苗；

优选地，在所述分苗前，还包括控水的步骤。

8.权利要求7的方法，分两次进行所述分苗，以使孢子体苗密度达到5-10株/16cm²；优选地，每次分苗后还包括缓苗的步骤。

9.权利要求8的方法，其中，第一次分苗使孢子体苗密度为8-15株/cm²(优选10株/cm²)；优选地，第一次分苗时所用培养基质和/或穴盘与播种时所用基质相同；优选地，第一次分苗完成缓苗后，每10-15天(例如每15天)喷施1次氮磷钾复合肥，例如2000倍稀释的花多多复合肥营养液，更优选2000倍稀释的花多多1号(20-20-20)复合肥营养液；优选地，第一次分苗后培养条件为：控制空气相对湿度80-100％，最低环境温度为12℃，最高环境温度为26℃；优选地，控制昼夜温差10℃以上。

10.权利要求8或9的方法，其中，第二次分苗时机为孢子体苗高2-3cm时；优选地，第二次分苗时选用泥炭藓(例如丹麦品氏托普泥炭藓，例如规格为10-30mm的丹麦品氏托普泥炭藓)作为培养基质；优选地，第二次分苗完成缓苗后，每8-15天(例如10天)喷施1次氮磷钾复合肥以及包膜复合肥；优选地，第二次分苗后培养条件为：空气相对湿度80-100％，最低环境温度为10℃，最高环境温度为30℃；优选地，控制昼夜温差10℃以上。