[发明专利]一种耐氧耐酸婴儿双歧杆菌及其筛选方法

说明书

本发明涉及发酵工程技术领域，更具体地，本发明提供一种耐氧耐酸婴儿双歧杆菌及其筛选方法。本发明的第一方面提供一种耐氧耐酸婴儿双歧杆菌，保藏号为CGMCC No.14803，其在特定培养基下达到在pH 4.0，普通有氧33～39℃下培养得到的活菌数高达7.9×10⁷，而相比于初始婴儿双歧杆菌在pH 4.0，普通有氧33～39℃下培养得到的活菌数为2.4×10³，具有明显的耐酸、耐氧性的提高。

技术领域

本发明涉及发酵工程技术领域，更具体地，本发明提供一种耐氧耐酸婴儿双歧杆菌及其筛选方法。

背景技术

2001年，世界粮农组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)对益生菌做了如下定义：通过摄取适当的量、对食用者的身体健康能发挥有效作用的活菌。作为益生菌应该具备以下条件：(1)无毒性、无致病性；(2)对人体安全；(3)能在消化道存活；(4)抗胃酸和胆汁；(5)能在肠道内定殖；(6)能够产生对宿主有用的酶类和代谢物；(7)在加工和贮存过程中能保持活性。2005年5月我国国家食品药品监督管理局颁布了《益生菌类保健食品申报与评审规定》，并公布了一批可用于保健食品的益生菌菌种，分别为：两歧双歧杆菌、双歧杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、德式乳杆菌保加利亚亚种、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌干酪亚种、嗜热链球菌和罗伊氏乳杆菌。

双歧杆菌(Bifidobacterium)是一种革兰氏阳性、不运动、细胞呈杆状、一端有时呈分叉状、严格厌氧的细菌属，广泛存在于人和动物的消化道、阴道和口腔等生境中。双歧杆菌属的细菌是人和动物肠道菌群的重要组成成员之一。双歧杆菌作为一种生理性有益菌，对人体健康具有生物屏障、营养作用、抗肿瘤作用、免疫增强作用、改善胃肠道功能、抗衰老等多种重要的生理功能。它能抑制人体有害细菌的生长，抵抗病原菌的感染，合成人体需要的维生素，促进人体对矿物质的吸收，产生醋酸、丙酸、丁酸和乳酸等有机酸刺激肠道蠕动，促进排便，防止便秘以及抑制肠道腐败作用、净化肠道环境、分解致癌物质、刺激人体免疫系统，从而提高抗病能力等方面有着重要作用。

影响双歧杆菌在生物制品存活率的因素有多种，包括菌种、pH、溶解氧、贮存条件、发酵产物等。由于双歧杆菌是专性厌氧菌，与好氧菌相比它缺乏将溶解氧转化为水分子的系统，致使氧气不能完全还原过氧化氢；另外，双歧杆菌体内缺乏过氧化氢酶，与氧气的接触会导致一些代谢产物如O₂^-、OH^-、H₂O₂在细胞内积累，最终导致细胞死亡，所以在制造和贮存过程中与溶解氧的接触是影响双歧杆菌存活和稳定性的一个重要因素。双歧杆菌对环境pH的变化也非常敏感，其最适生长pH为6.5～7.0，当环境pH一旦高于8.0或低于4.5时，便会停止生长，甚至会大量死亡，特别是人源性双歧杆菌其酸耐受力非常差。众所周知，双歧杆菌只有在肠道内才能发生益生功能，所以它必须具有良好的贮存稳定性和耐酸性能。双歧杆菌在有氧和酸度较低的条件下，生长缓慢并且容易死亡，而在实际生产过程中严格厌氧不仅难度大而且成本高，给生产双歧杆菌制品的厂家带来很大困难，因此筛选一株耐氧耐酸婴儿双歧杆菌具有重要意义。

发明内容

为解决上述问题，本发明的第一方面提供一种耐氧耐酸婴儿双歧杆菌，保藏号为CGMCC No.14803。

作为本发明的一种优选技术方案，所述耐氧耐酸婴儿双歧杆菌的活菌数为7.9×10⁷，其中，所述耐氧耐酸婴儿双歧杆菌的培养条件为pH 4.0，普通有氧33～39℃下培养。

作为本发明的一种优选技术方案，所述耐氧耐酸婴儿双歧杆菌的培养所用的培养基组成包括：葡萄糖、乳糖、蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸粉、氯化钠、氯化镁，磷酸氢二钾、硫酸锌、L-半胱氨酸盐酸盐、谷氨酸。

本发明的第二方面提供一种所述耐氧耐酸婴儿双歧杆菌的筛选方法，通过双歧杆菌进行连续耐氧、耐酸驯化所得。