[发明专利]一种特异性蛋白WIPI1在早期心梗诊断试剂中的应用及试剂盒

说明书

本发明涉及一种特异性蛋白WIPI1在早期心梗诊断试剂中的应用，特异性蛋白WIPI1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，在具体检测时，心肌损伤后，外周血中特异性蛋白WIPI1含量增加。与现有技术相比，本发明技术方案的诊断试剂有助于早期诊断，可以反映心肌损伤的严重程度，可以作为早期心梗诊断预测的指标，并且检测方法较为简单易操，并且具有较好的检测灵敏度，具有较小的系统误差，可将WIPI1基因编码的特异性蛋白WIPI1在心肌损伤诊断试剂中的应用进行广泛的推广；利用本发明的试剂盒检测方法简单、成本低、检测结果直接、可靠，适用于大规模的筛检和诊断。

技术领域

本发明涉及生物医学领域，尤其是涉及一种特异性蛋白WIPI1在早期心梗诊断试剂中的应用及试剂盒。

背景技术

目前急性心肌梗死(AMI)检测的主要生化标志物有肌酸磷酸激酶同工(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白(cTnT)和心肌肌钙蛋白I(cTnI)等。CK-MB、LDH广泛分布于体内，因此特异性较低，许多疾病都可导致它们的升高，且在血液中维持时间较短；cTnT与骨骼肌肌钙蛋白T(sTnT)同源性较高，容易发生交叉反应。而cTnI具有特异性高、出现时间早、敏感度高和在血液中持续时间长等优点，可作为AMI早期诊断指标，所以目前的试剂盒检测方式主要围绕心肌肌钙蛋白I(cTnI)。

心肌肌钙蛋白I(cTnI)的检测方法，包括酶联免疫吸附测定(ELISA)免疫分析纸条检测等。尽管心肌肌钙蛋白I(cTnI)特异性更高，但它的对于心肌损伤的预见性不高。免疫分析试纸条检测，该方法主要采用胶体金免疫层析法或荧光免疫层析法的原理，操作简单、方便快捷但灵敏度较低，准确性低易出现漏检情况。

CN1227533C中利用人心肌钙结合蛋白S100A1在心肌梗塞患者血浆中的特异表现，将经标记后的人心肌钙结合蛋白S100A1单克隆或多克隆抗体固定在支持物上作为检测试剂，采用ELISA方法或金标法，根据检测试剂与样品中抗原反应后颜色的变化测定血液中抗原一心肌钙结合蛋白S100A1的含量，作出诊断结论。该方法在准确度上还待提高，并且容易出现漏检的情况。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种特异性蛋白WIPI1在早期心梗诊断试剂中的应用及试剂盒，通过WIPI1含量的检测可以反映心肌损伤的严重程度，以此作为早期心梗诊断预测的指标。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

本发明中特异性蛋白WIPI1在早期心梗诊断试剂中具有较好的应用，其中特异性蛋白WIPI1由WIP1基因编码而成，特异性蛋白WIPI1的氨基酸序列如附件中SEQ ID NO.1所示。其中WIPI1基因来自人体。

进一步地，心肌损伤后，外周血中特异性蛋白WIPI1含量增加。WIPI1特异性蛋白可以作为一个重要的蛋白分子标识物，在心梗早期检测疾病的发生。

进一步地，外周血中特异性蛋白WIPI1含量由酶联免疫吸附实验获得。

进一步地，所述的免疫吸附实验中采用WIPI1作为抗原。

进一步地，所述的免疫吸附实验中使用的WIPI1浓度为10～20μg/ml。

进一步地，所述的免疫吸附实验中通过酶标仪测试吸光度来获得特异性蛋白WIPI1的浓度。

进一步地，通过WIPI1活性检测试剂盒对外周血中特异性蛋白WIPI1含量进行检测。

进一步地，所述的WIPI1活性检测试剂盒采用分光光度法检测外周血细胞或组织裂解液中Wip 1酶活性或纯化的WIPI1酶活性，以此得到特异性蛋白WIPI1含量的变化趋势。

进一步地，分光光度法检测时选取405nm处的吸收峰值。