[发明专利]编码人卵黄状黄斑病蛋白1的核酸分子及其应用

权利要求书

1.编码人卵黄状黄斑病蛋白1的核酸，包括I)～IV)中至少一种：

I)、具有如SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的核酸；

II)、在I)所述的片段中取代、缺失或添加一个或多个核苷酸的核酸；

III)、与如I所示的核苷酸序列具有至少70％同源性的序列且编码如SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的蛋白的核酸；

IV)、与I)～III)中任一项部分互补或完全互补的核酸。

2.人卵黄状黄斑病蛋白1的转录单元，其包括：启动子、权利要求1所述的核酸和终止子。

3.根据权利要求2所述的转录单元，其特征在于，其5’端至3’端依次包括：

启动子、调控片段、权利要求1所述的核酸和终止子；

或启动子、权利要求1所述的核酸、调控片段和终止子；

或启动子、调控片段1、权利要求1所述的核酸、调控片段2和终止子。

4.重组载体，其包括骨架载体和权利要求1所述的核酸。

5.根据权利要求4所述的重组载体，其特征在于，其为病毒载体；

所述病毒载体选自DNA病毒载体、逆转录病毒载体、慢病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体中至少一种；其中，腺相关病毒载体的血清型为AAV2、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8或AAV9。

6.根据权利要求4或5所述的重组载体，其特征在于，其骨架载体为AAV-MCS。

7.根据权利要求6所述的重组载体，其特征在于，其包括依次连接的：上游ITR、CMV增强子、CMV启动子、SEQ ID NO:1所示序列的核酸片段、hGHpoly(A)信号片段和下游ITR。

8.一种质粒组合，其特征在于，包括权利要求4～7任一项所述的重组载体、辅助功能质粒和附属功能质粒。

9.根据权利要求8所述的质粒组合，其特征在于，所述辅助功能质粒为pAdHelper；所述附属功能质粒为pAAV2/5。

10.表达人卵黄状黄斑病蛋白1的腺相关病毒的制备方法，其包括：将权利要求8或9所述的质粒组合感染宿主细胞后，经纯化获得表达人卵黄状黄斑病蛋白1的腺相关病毒。

11.权利要求10所述制备方法制备获得的表达人卵黄状黄斑病蛋白1的腺相关病毒。

12.权利要求4～7任一项所述的重组载体、权利要求8或9所述的质粒组合或权利要求11所述的腺相关病毒在制备恢复视力和/或治疗眼部疾病的药物中的应用。

13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述眼部疾病为视网膜病变；优选的，所述视网膜病变为遗传性视网膜病变；更优选的，所述视网膜病变为卵黄样黄斑营养不良。

14.一种药物，其特征在于，包括权利要求4～7任一项所述的重组载体、权利要求8或9所述的质粒组合或权利要求11所述的腺相关病毒。

15.根据权利要求14所述的药物，其特征在于，包括权利要求11所述的腺相关病毒和药学上可接受的辅料，其中权利要求11所述的腺相关病毒的滴度为5×10¹⁰vg/mL～1×10¹²vg/mL。

16.一种药物的递送方法，其特征在于，将如权利要求10～12任一项所述的药物制剂注射至眼部，优选地为视网膜下注射。