[发明专利]一种快速检测新冠病毒IgG抗体的方法和试剂盒在审
申请号: | 202010745098.9 | 申请日: | 2020-07-29 |
公开(公告)号: | CN111830261A | 公开(公告)日: | 2020-10-27 |
发明(设计)人: | 胡克平;陈兴;钱朝晖;陈杰勇;刘炎;李彩虹;马光;王梦晨;刘明樵;张娜;闫旭南;张伟 | 申请(专利权)人: | 安第斯抗体生物技术衡水有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/58;G01N33/569;G01N33/543 |
代理公司: | 北京八月瓜知识产权代理有限公司 11543 | 代理人: | 李斌 |
地址: | 053000 河北省衡水市高新*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 检测 病毒 igg 抗体 方法 试剂盒 | ||
1.一种快速检测新冠病毒IgG抗体的方法,其特征在于,包括:
S1:将重组新冠病毒N蛋白包被于固相载体上;
S2:向包被有重组新冠病毒N蛋白的固相载体中加入待检样本,孵育、洗涤;
S3:向洗涤后的固相载体中加入酶标二抗,孵育、洗涤,随后显色;
优选地,所述重组新冠病毒N蛋白的浓度为3-5μg/mL,更优选为4μg/mL;
优选地,所述固相载体为酶联板。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述重组新冠病毒N蛋白的加入量为50-150μL/孔,优选为100μL/孔;所述待检样本的加入量为50-150μL/孔,优选为100μL/孔;所述酶标二抗的加入量为50-150μL/孔,优选为100μL/孔。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述重组新冠病毒N蛋白的制备方法包括:将新型冠状病毒N蛋白基因克隆至大肠杆菌表达系统,获得重组大肠杆菌;对所述重组大肠杆菌进行培养,对培养液进行分离和纯化,获得重组新冠病毒N蛋白。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述待检样本为稀释血浆或稀释血清;
优选地,所述稀释血浆或稀释血清的稀释倍数为50-200倍,进一步优选为50-150倍,更优选为100倍。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述酶标二抗为HRP-羊抗人IgG酶标二抗。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在加入待检样本或酶标二抗后,贴好封板膜,轻轻拍打固相载体的边缘2-4下,随后孵育;在孵育结束后揭开封板膜,甩干固相载体中的液体,用洗涤液洗涤4-6次,再用吸水纸拍干固相载体中的水分。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,控制所述孵育的温度为35-40℃,优选为37℃;
优选地,控制所述孵育的时间为5-30min,进一步优选为5-15min,更优选为10min;
优选地,洗涤时洗涤液的加入量为200-300μL/孔,更优选为300μL/孔。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,控制所述显色的时间为0.5-2min。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,将样本稀释液由4℃平衡至室温后进行使用。
10.一种快速检测新冠病毒IgG抗体的试剂盒,其特征在于,包括包被有重组新冠病毒N蛋白的固相载体和酶标二抗;
优选地,所述酶标二抗为HRP-羊抗人IgG酶标二抗;
优选地,所述重组新冠病毒N蛋白的包被浓度为3-5μg/mL,更优选为4μg/mL。
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