[发明专利]一种基于夹板水培法的玉米根系突变体筛选方法

权利要求书

1.一种基于夹板水培法的玉米根系突变体筛选方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1、玉米种子消毒，将玉米种子置于50 mL的圆底无菌离心管中，在室温下先用ddH₂O洗涤2次，去除玉米种子表面杂质；然后用70%的乙醇溶液表面消毒5 min，然后将乙醇溶液沥出，用ddH₂O将种子洗三次；洗净后，用12%的花王消毒溶液消毒15 min，再将花王消毒溶液沥出，然后用ddH₂O将种子洗三次；将玉米种子放在滤纸上静置，静置至玉米种子表面变干；

S2、在夹板培养装置中培养，所述夹板培养装置包括内玻璃板（2）、发芽纸（3）、外玻璃板（4）和固定夹（1），所述发芽纸（3）设置有两层，且其分别设置在内玻璃板（2）和外玻璃板（4）的相邻侧，所述固定夹（1）设置有四个，所述内玻璃板（2）与外玻璃板（4）之间通过四个固定夹（1）固定，玉米种子设置在两层发芽纸（3）之间，所述固定夹（1）与内玻璃板（2）和外玻璃板（4）接触处设置有海绵垫（6），夹板培养装置用配制好的2.5 g/L克菌丹溶液进行浸润处理，然后夹板间隙中放置8个大小相同的消毒后的玉米种子，玉米种子水平距离为3cm，依次做好标记，且每个夹板培养装置中含有至少一个野生型玉米，然后以30个夹板培养装置为一组，放置在培养盆中进行培养，且在培养盆加入霍格兰培养液，霍格兰培养液将夹板培养装置浸没，霍格兰培养液将夹板培养装置浸没具体是夹板培养装置的内玻璃板（2）和外玻璃板（4）在培养盆中竖向放置，培养盆中的霍格兰培养液浸没发芽纸（3）下部至少2cm处，置于光照培养室内培养；

S3、玉米根系性状记录，玉米种子在培养盆中培养14天，在玉米种子培养14天后记录各组玉米种子发芽成的玉米幼苗的根系结构，利用Epson Perfection V700 Photo系统对玉米幼苗的根系结构进行扫描，使用WinRhizo根系分析系统对扫描图像进行根特征分析；

S4、筛选移栽，将扫描分析后经过筛选的玉米突变体移栽至无纺布培养袋中，培养袋中放置有培养基质，移栽后向玉米突变体根部施加生根溶液以促进玉米生根，室内培养7天后，移栽大田，完成玉米突变体筛选过程。

2.根据权利要求1所述的一种基于夹板水培法的玉米根系突变体筛选方法，其特征在于，所述霍格兰培养液根据Hoagland and Arnon 1950配方配置。

3.根据权利要求1所述的一种基于夹板水培法的玉米根系突变体筛选方法，其特征在于，在S2中夹板培养装置浸润处理具体为将裁剪好的发芽纸（3）浸泡于配制好的2.5 g/L克菌丹溶液中使其完全湿润，然后捞出，挤压掉多余的克菌丹溶液。

4.根据权利要求1所述的一种基于夹板水培法的玉米根系突变体筛选方法，其特征在于，在S4中，所述无纺布培养袋具体为12×15 cm的无纺布培养袋，培养基质为营养土和蛭石，且其比例为3：1。