[发明专利]一种细胞低氧实验装置及分析方法

权利要求书

1.一种细胞低氧实验装置，其特征在于，包括：下层板(2)，所述下层板(2)内嵌圣诞树网络结构的气体管道，所述气体管道由蜿蜒通道(4)和水平通道(5)组成，利用通道内层流和混流效应产生浓度梯度；所述下层板(2)设置有细胞培养室(6)。

2.如权利要求1所述的细胞低氧实验装置，其特征在于，所述圣诞树网络结构的气体管道的上端面设置有气体入口(3)，其下端面与所述细胞培养室(6)连接。

3.如权利要求1所述的细胞低氧实验装置，其特征在于，所述细胞培养室(6)设有带螺丝孔的上层盖板(1)，且通过螺丝孔与所述细胞培养室(6)连接。

4.如权利要求3所述的细胞低氧实验装置，其特征在于，所述上层盖板(1)设有软硅胶垫，所述上层盖板(1)通过软硅胶垫与所述细胞培养室(6)连接。

5.如权利要求1所述的细胞低氧实验装置，其特征在于，所述细胞培养室(6)设置有气体出口(7)。

6.如权利要求2所述的细胞低氧实验装置，其特征在于，所述圣诞树网络结构的气体管道的上端面设置有2个气体入口(3)，其下端面设置有5个浓度梯度气体流出口。

7.如权利要求6所述的细胞低氧实验装置，其特征在于，所述5个浓度梯度流出口通往所述细胞培养室(6)内。

8.一种利用如权利要求1所述的细胞低氧实验装置的分析方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

步骤1，将带有细胞的纸芯片放入所述细胞培养室(6)中，进行低氧浓度梯度处理；

步骤2，荧光成像法检测纸芯片上细胞内的相关信号变化；

步骤3，将带有细胞的纸芯片放入离心管中消化收集细胞，进行流式细胞仪分析；

步骤4，将带有细胞的纸芯片放入离心管进行细胞裂解，收集蛋白进行western blot分析或提取细胞RNA进行逆转录PCR或实时荧光定量PCR。

9.如权利要求1所述的细胞低氧实验装置的分析方法，其特征在于，步骤1中，具体步骤为：将纸芯片的两面紫外照射过夜灭菌，将纸芯片上加入稀释40倍的Matrigel，4℃过夜，然后在37℃放置1小时让Matrigel凝固，将纸芯片放在24孔板中，加入细胞悬液，待细胞贴壁牢固后，将带有细胞的纸芯片放入提前加入培养基的细胞培养室(6)中，将上层盖板(1)及软硅胶垫嵌入所述下层板(2)内，两个气体入口(3)以同样的压力分别输入空气和氮气，将细胞低氧实验装置放入细胞培养箱，细胞在低氧梯度装置中处理。