[发明专利]一种双主茎半矮杆甘蓝型油菜的选育方法

权利要求书

1.一种双主茎半矮杆甘蓝型油菜的选育方法，其特征在于，所述双主茎半矮杆甘蓝型油菜的选育方法包括以下步骤：

步骤一，利用成熟稳定且综合性状较好的隐性双主茎甘蓝型油菜材料作为母本，去雄；取成熟稳定且综合性状较好的显性矮杆甘蓝型油菜材料花粉作为父本，进行杂交；

步骤二，在F₁种植成株行，套袋自交，按单株收获分别脱粒，并使用甲基磺酸乙酯对甘蓝型油菜自交系的种子进行诱变处理；

步骤三，在F₂分别种植F₁单株，调查双主茎矮杆性状分离情况；选择既是矮杆性状且有双主茎性状的单株套袋自交，按单株收获分别脱粒；

步骤四，在F₃分别将F₂的自交单株全部种植，调查双主茎矮杆性状分离情况；筛选整个全部为双主茎矮杆性状的株行套袋自交，按单株收获分别脱粒；

步骤五，在F₄分别种植F₃的自交单株，获得F_4:3家系；

步骤六，取F_4:3家系植株花粉培养单倍体植株，同时在田间重复调查F_4:3家系主茎株高性状，对稳定表现双主茎半矮杆性状的家系的单倍体植株进行加倍处理，获得双主茎半矮杆甘蓝型油菜群体；

步骤七，将获得的双主茎半矮杆甘蓝型油菜群体的双主茎矮杆性状的遗传性和稳定性进行田间鉴定，保留在田间出现稳定半矮杆性状的群体，即可得到所述双主茎半矮杆甘蓝型油菜。

2.如权利要求1所述的双主茎半矮杆甘蓝型油菜的选育方法，其特征在于，步骤二中，所述使用甲基磺酸乙酯对甘蓝型油菜自交系的种子进行诱变处理的方法，包括：

(1)进行甘蓝型油菜自交系种子的选取，选择颗粒饱满无破损、性状明显的种子作为甘蓝型油菜自交系种子；

(2)将选取的种子置于清水中，进行8～12h浸泡；

(3)将浸泡后的种子使用甲基磺酸乙酯进行浸泡，浸泡时间为3～4h；

(4)将浸泡后的种子取出，使用清水进行冲洗，洗净表面残留的甲基磺酸乙酯；

(5)将洗净后的种子置于干燥的滤纸上，然后设定培养温度为20～25℃，湿度为40～60％，进行种子培养，得到处理后的甘蓝型油菜自交系的种子；

(6)对处理后的甘蓝型油菜自交系的种子进行培育，获得F₁代植株。

3.如权利要求2所述的双主茎半矮杆甘蓝型油菜的选育方法，其特征在于，步骤(3)中，所述甲基磺酸乙酯的浓度为0.6％。

4.如权利要求2所述的双主茎半矮杆甘蓝型油菜的选育方法，其特征在于，步骤(3)中，所述将浸泡后的种子使用甲基磺酸乙酯进行浸泡的方法为：

鸟嘌呤的氧原子位置被烷基化；在DNA复制过程中，烷基化鸟嘌呤与胸腺嘧啶配对，导致碱基替换，即G:C变为A:T。

5.如权利要求1所述的双主茎半矮杆甘蓝型油菜的选育方法，其特征在于，步骤五中，所述F_2:3家系的植株高度为120～140mm。

6.如权利要求1所述的双主茎半矮杆甘蓝型油菜的选育方法，其特征在于，步骤六中，所述培养单倍体植株的方法为：在初花期取F_2:3家系植株主花序和上部分枝花序上幼蕾的花粉，进行小孢子培养，得到单倍体植株。

7.如权利要求6所述的双主茎半矮杆甘蓝型油菜的选育方法，其特征在于，所述对稳定表现双主茎半矮杆性状的家系的单倍体植株进行加倍处理的方法，包括：

(a)摘取花蕾，使用B5-13培养基分离出游离小孢子，然后使用含有200mg/L秋水仙素的NLN-13培养基将游离小孢子进行分开盛放；

(b)将盛放有游离小孢子的培养基置于暗室中，设定培养温度为27～29℃，进行20～24h培养；

(c)更换培养基为不含秋水仙素的NLN-13培养基，将培养基置于暗室中，设定培养温度为26～30℃，培养36～48h后降低温度至25℃，继续培养6～9天，获得诱导出来的胚状体。