[发明专利]检测鸡滑液囊支原体的套式PCR引物、检测方法及试剂盒在审
申请号: | 202010757051.4 | 申请日: | 2020-07-31 |
公开(公告)号: | CN111690758A | 公开(公告)日: | 2020-09-22 |
发明(设计)人: | 杨铜;刘岳龙;王莉;尹丽萍;戎双琳;牟抑扬;张凯云;程立力 | 申请(专利权)人: | 江苏立华牧业股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/35 |
代理公司: | 常州佰业腾飞专利代理事务所(普通合伙) 32231 | 代理人: | 王巍巍 |
地址: | 213168 江苏省常州*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 鸡滑液囊 支原体 pcr 引物 方法 试剂盒 | ||
1.一种检测鸡滑液囊支原体的套式PCR引物,其特征在于,包括一对内套引物和一对外套引物,
所述内套引物为:
MS-F1:5’-CTGTTATAGCAATTTCATGTGGTG-3’;
MS-R1:5’-TGTTGTAGTTGCTTCAACTTGTCT-3’;
所述外套引物为:
MS-F2:5’-TATTAGCAGCTAGTGCAGTG-3’;
MS-R2:5’-TCCTTTAACGATGTTAGGTTTTC-3’。
2.鸡滑液囊支原体的套式PCR引物的检测方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)从待测样品中提取核酸模板;
(2)将权利要求1中所述的外套引物加入套式PCR的第一轮反应体系中扩增检测核酸模板,得第一轮PCR扩增产物;
(3)将权利要求1中所述的内套引物和步骤(2)制备的PCR扩增产物加入到套式PCR的第二轮反应体系中,得第二轮扩增产物;
(4)第二轮扩增产物进行凝胶电泳,得检测结果。
3.权利要求2所述的鸡滑液囊支原体的套式PCR引物的检测方法,其特征在于:外套引物的反应条件为:95℃预变性5min,95℃变性30s,57℃退火30s,72℃延伸30s,35个循环,72℃再延伸5min,16℃保存;内套引物的反应条件为:95℃预变性5min,95℃变性30s,52℃退火30s,72℃延伸30s,35个循环,72℃再延伸5min,16℃保存。
4.用于检测鸡滑液囊支原体的套式PCR检测试剂盒,其特征在于:包括权利要求1所述的用于检测鸡滑液囊支原体的套式PCR引物。
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