[发明专利]一种甲硫氨酸裂解酶及其编码基因和应用

说明书

本发明公开了一种甲硫氨酸裂解酶及其编码基因和应用，属于甲硫氨酸裂解酶技术领域。所述甲硫氨酸裂解酶的编码基因的cDNA序列如SEQ ID No.7所示。本发明还公开了一种甲硫氨酸裂解酶及其生物合成方法和应用，还公开了一种重组表达载体和一种重组宿主细胞。本发明的甲硫氨酸裂解酶的编码基因，能够在宿主细胞中高效表达来源于解脂耶氏酵母的甲硫氨酸降解酶，且其酶活高于其它真核来源的甲硫氨酸降解酶。

技术领域

本发明涉及一种甲硫氨酸裂解酶及其编码基因和应用，属于甲硫氨酸裂 解酶技术领域。

背景技术

临床上多种恶性肿瘤均具有甲硫氨酸依赖特性。甲硫氨酸的化学结构式 如下：

基于这种特性，消耗肿瘤细胞胞依赖的甲硫氨酸成为治疗恶性肿瘤的一 种重要方法。甲硫氨酸裂解酶能将甲硫氨酸降解为α-酮丁酸、甲基硫醇和 氨，主要通过食物添加、化学载体介导或者基因疗法降低体内的甲硫氨酸浓 度，发挥治疗或者辅助治疗的作用。

目前，原核来源的甲硫氨酸降解酶由于引起哺乳动物细胞强烈的免疫反 应和不稳定性，限制了其在临床上的应用。真核来源的甲硫氨酸降解酶由于 具有低免疫性等特点而成为开发的重点，但是，目前报道的真核来源的甲硫 氨酸降解酶的活性普遍较低。

另外，甲硫氨酸降解产物——甲基硫醇及其衍生物二甲基硫、二甲基二 硫和二甲基三硫是重要的食品香料添加剂，主要用于配制玉米、番茄、土豆、 奶制品、菠萝和橘子类果香及青香型香精。因此，在食品中添加甲硫氨酸降 解酶可以改善发酵食品的香味。

鉴于此，有必要研发一种真核来源的、高效的甲硫氨酸裂解酶，以解决 现有技术的不足。

发明内容

本发明的目的之一，是提供一种甲硫氨酸裂解酶的编码基因。本发明的 甲硫氨酸裂解酶的编码基因，能够在宿主细胞中高效表达来源于解脂耶氏酵 母(Yarrowialipolytica)的甲硫氨酸降解酶YALI0C22088g-Y59A，且其酶 活高于目前已报道的其它真核来源的甲硫氨酸降解酶。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种甲硫氨酸裂解酶的编码 基因，其cDNA序列为(a)、(b)和(c)中的任一种所示:

(a)SEQ ID No.7所示的核苷酸；

(b)与SEQ ID NO.7的互补序列在严谨杂交条件能够进行杂交的核苷酸；

(c)与SEQ ID No.7所示的核苷酸序列至少有80％以上同源性的核苷酸序 列。