[发明专利]一株阴沟肠杆菌及其活菌制剂生产方法与应用

说明书

本发明公开了一株耐盐碱阴沟肠杆菌及其活菌制剂生产方法与应用。本发明自盐碱地辣椒根际土壤分离到一株耐盐碱阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)ZTS‑10，该菌株在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)的保藏编号为CGMCC No.20181，保藏日期为2020年7月3日。该菌株耐盐碱能力较强，在盐碱土壤中定植率高，具有产IAA、解磷、解钾能力，能促进辣椒生长，且对辣椒疫病病原菌具有较强的拮抗作用，可用于生产微生物肥料，特别是盐碱地辣椒专用微生物肥料，可减少辣椒疫病发生，提高产量和质量。

技术领域

本发明涉及一株耐盐碱阴沟肠杆菌及其活菌制剂生产方法与应用，属于农业生物技术领域。

背景技术

我国是辣椒生产大国，全国辣椒种植面积可达200万公顷，占蔬菜种植面积12％以上。辣椒适应性强、品种多、经济效益高，已成为许多地区农民增收、农村发展的重要支柱产品。辣椒疫病是当前威胁辣椒生产最严重的病害，该病害已经在世界各地的辣椒种植区广泛发生。如果田间发病条件适宜，该病害可以造成大约30％的减产，有时甚至高达100％，严重制约经济的发展。

辣椒疫病主要是由辣椒疫霉(Phytophthora capsici)引起的毁灭性真菌病害。辣椒疫霉主要以卵孢子和厚垣孢子的形式在植物种子、土壤和宿主植物的病残体中越冬，当温度与湿度适宜时萌发，侵染植物致其发病。辣椒疫病多发生在辣椒现蕾挂果时期，田间扩展迅速，常造成大面积成片死亡。

长期以来，辣椒疫病防控以化学防治为主，并结合优化栽培管理、改良灌溉方式等技术措施。化学防治以大量使用农用甲霜灵、精甲霜灵等苯酰胺类杀菌剂为主，虽然取得良好的防控效果，但化学农药的过量使用不仅使辣椒疫霉菌逐步产生一定程度的抗药性，而且对人类健康、食品安全和环境保护造成巨大的潜在威胁。因此，发展生物防治技术，减量化学农药的使用，是现代农业发展的必然趋势。

生物防治是指利用有益生物或基因产物来控制植物病害发生、发展的一种措施。其具有不污染环境、对人和其他生物安全、节约能源、保持生态平衡等优点，是发展绿色食品、保护生态环境的重要手段。辣椒疫病的生物防治措施主要包括筛选利用拮抗微生物、诱导寄主产生抗病性、采用基因工程技术防治辣椒疫病和开发生物源杀菌剂等。目前，芽孢杆菌、荧光假单胞杆菌等拮抗细菌，木霉菌、曲霉菌和寡雄腐霉菌等拮抗真菌已用于辣椒疫病的生物防治，但由于防治效果有限，对辣椒生长无明显促进作用，未能在农业生产中大面积推广。

盐碱地是我国重要的土地资源，我国盐碱地和盐碱障碍耕地总面积超过5亿亩，其中具有农业利用潜力的多达2亿亩，占中国耕地面积的10％左右。辣椒具有一定的耐盐碱能力，是盐碱地广为栽培的蔬菜作物之一。盐碱地辣椒疫病的生物防治，除要求生防菌株具有较好的抗病促生效果外，还要求其具有较强的耐盐碱能力，能够在盐碱土壤中定植。因此，筛选耐盐碱抗病促生菌株，具有重要意义。

针对上述现状，本发明提供一株耐盐碱阴沟肠杆菌，用于促进辣椒生长和辣椒疫病的生物防治，特别是用于盐碱地栽培辣椒疫病的生物防治。

发明内容

本发明的目的是提供一株阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)ZTS-10及其活菌制剂的制备方法与应用。阴沟肠杆菌ZTS-10菌株分离自盐碱地辣椒根际土壤，耐盐碱能力强，具有产 IAA、解磷、解钾、拮抗辣椒疫霉的能力，其活菌制剂能促进辣椒生长，对辣椒疫霉引起的辣椒疫病具有较高的防效。

一株分离自盐碱地辣椒根际土壤的耐盐碱阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)ZTS-10，该菌株在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)的保藏编号为CGMCC No.20181；保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2020年7月3日。

所述阴沟肠杆菌ZTS-10菌株的菌落及菌体特征：在NA培养基上于37℃培养48h，菌落直径约0.5-0.8mm，白色半透明，圆形，表面光滑，隆起，湿润，粘稠，有光泽，质地均匀，边缘整齐；菌体呈短杆状。