[发明专利]一种新型免疫组化三合一试剂配方

说明书

本发明一种新型免疫组化三合一试剂配方，属于免疫组化领域；由以下原料组成，以质量数计：0.1‑0.4g Triton X‑100；1ml‑4ml过氧化氢；0.5ml‑2ml山羊血清；0.1g‑0.4g BSA；0.01g‑0.04g吐温‑20；0.001g‑0.01gEDTA；0.1g‑0.4g PC300溶于17ml PBS，PH为7.4。本发明有效缩短免疫组化时间且不影响免疫组化实验效果。

技术领域

本发明属于免疫组化领域，尤其涉及一种新型免疫组化三合一试剂配方。

背景技术

免疫组化，是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及相对定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。

免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性的抗体，再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的，因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来，以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性，定位或定量的研究。

近年来，随着免疫组织化学技术的发展和各种特异性抗体的出现，使许多疑难肿瘤得到了明确诊断。在常规肿瘤病理诊断中，5％-10％的病例单靠H.E.染色难以作出明确的形态学诊断。尤其是免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可，其在低分化或未分化肿瘤的鉴别诊断时，准确率可达50％-75％。

因此免疫组化实验在体外诊断市场中占有非常大的比例。免疫组化实验常规步骤，制样；抗原修复；通透；清除内源性过氧化物酶；封闭；一抗孵育；二抗孵育，显色；苏木素复染。免疫组化时长3小时左右，缩短免疫组化时间对于提高体外诊断效率是非常有必要的。因此发明有效缩短免疫组化实验时长。

发明内容

本发明目的在于提供一种新型免疫组化三合一试剂配方，以解决在不影响实验结果的情况下，缩短免疫组化实验时间的技术问题。

为实现上述目的，本发明的一种新型免疫组化三合一试剂配方的具体技术方案如下：

利用通透；清除内源性过氧化物酶；封闭等步骤时长差不多，配制相应试剂，整合这三个步骤，缩短免疫组化实验时间；

本发明采用将免疫组化通透，消除内源性过氧化物酶，封闭等步骤的有效成分配制到同一试剂中，而不影响免疫组化实验效果，具体制备过程如下：

通透的Triton X-100(聚乙醇辛基苯基醚)，消除内源性过氧化物酶的过氧化氢和封闭的山羊血清及0.2g 1％BSA等与其他成分吐温-20、EDTA、PC300溶于PBS(PH为7.4)；

其中最优的方案为：0.1-0.4g Triton X-100；1ml-4ml过氧化氢；0.5ml-2ml山羊血清；0.1g-0.4g BSA(牛血清白蛋白)；0.01g-0.04g吐温-20；0.001g-0.01g EDTA；0.1g-0.4g PC300等成分溶于17ml PBS(PH为7.4)。

进一步，由以下原料组成，以质量数计：

0.2g Triton X-100；2ml过氧化氢；1ml山羊血清；0.2g 1％BSA；0.02g吐温-20；0.0067g EDTA；0.2g PC300，溶于17ml PBS，PH为7.4。

进一步，由以下原料组成，以质量数计：