[发明专利]一种基于聚苯胺吸附双链DNA的传感器检测DNA的方法

权利要求书

1.一种基于聚苯胺吸附双链DNA的化学发光传感器检测DNA的方法，其特征在于，该方法具有以下检测原理：

当不存在待检测的目标DNA时，聚苯胺共价修饰的磁性氧化石墨烯不会固定单链的互补链DNA，经过磁铁磁性分离后，上清液中互补链DNA修饰的钴卟啉的含量不变，化学发光反应的催化性能不发生变化；当待检测的目标DNA存在时，与互补链DNA进行碱基互补配对，形成双链DNA，形成的双链DNA-卟啉钴会被固定在聚苯胺共价修饰的磁性氧化石墨烯表面，经过磁铁磁性分离后，上清液中互补链DNA修饰的钴卟啉的含量会减少，使得化学发光反应的催化性能降低，以此实现目标DNA含量的检测；

其中所述的聚苯胺共价修饰的磁性氧化石墨烯和互补链DNA修饰的钴卟啉的制备具有以下工艺步骤：

(1)聚苯胺共价修饰的磁性氧化石墨烯的制备：向100mL三口烧瓶中加入30～50mL 1.0～2.5mol/L的盐酸溶液，随后加入纯化后的苯胺1.0～2.5g，再加入0.1～0.25g磁性氧化石墨烯，在冰浴环境下磁力搅拌0.5～2h，使其充分分散；缓慢滴加10～30mL 1.0～2.5mol/L的过硫酸铵溶液，滴加速度控制在0.08～0.12mL/min，滴完之后继续在冰浴环境中反应1～2h；用超纯水洗涤产物3～5次，直至滤液为无色；产物用外磁场收集；放入50～80℃真空干燥箱进行干燥8～12h；干燥后，研磨；

(2)互补链DNA修饰的钴卟啉的制备：移取1.0～2.5mL 0.1～0.5mmol/L的钴卟啉溶液放入5mL离心管中，加入0.1～0.5mL 50～80umol/L的互补链DNA，室温下振荡孵化2～5h；在8000～10000rad/min的转速下离心分离3～5min，倒掉上清液，以除去未反应的互补链DNA；将产物转移到25mL的容量瓶中定容，储存于4℃的条件下备用。

2.根据权利要求1所述的一种基于聚苯胺吸附双链DNA的化学发光传感器检测DNA的方法，其特征是：以互补链DNA作为识别元件，双链DNA间的碱基互补配对作用提高了该传感器的选择性。

3.根据权利要求1所述的一种基于聚苯胺吸附双链DNA的化学发光传感器检测DNA的方法，其特征是：以钴卟啉为化学发光催化剂，提高了该传感器的灵敏度。

4.根据权利要求1所述的一种基于聚苯胺吸附双链DNA的化学发光传感器检测DNA的方法，其特征是：通过改变目标DNA和互补链DNA的序列，可以实现不同序列的目标DNA检测。

5.根据权利要求1所述的一种基于聚苯胺吸附双链DNA的化学发光传感器检测DNA的方法，其特征是：聚苯胺共价修饰的磁性氧化石墨烯的工艺步骤(1)中所述的纯化后的苯胺由质量分数75％～80％的苯胺经二次减压蒸馏提纯获得。

6.根据权利要求1所述的一种基于聚苯胺吸附双链DNA的化学发光传感器检测DNA的方法，其特征是：聚苯胺共价修饰的磁性氧化石墨烯的工艺步骤(1)中所述的聚苯胺共价修饰的磁性氧化石墨烯的合成条件简单、形貌可控性强，粒径范围为80nm～100nm。