[发明专利]一种深海独岛枝芽胞杆菌培养基和剂型

说明书

本发明属于农业微生物学技术领域，具体涉及一种深海独岛枝芽胞杆菌培养基和剂型。本发明提供了一种原料易得的培养基，该培养基发酵上清液经5倍稀释在离体处理南方根结线虫（Meloidogyne incognita）48 h后，其效果要远好于利用2216e海水培养基培养获得的发酵液上清5倍稀释液。在发酵液或发酵上清液中添加0.25‑1%的苯甲酸钠或0.1‑0.3%的山梨酸钾，可获得可稳定贮藏的液体剂型，使得其货架期保持至少3个月。本发明提供的培养基非常适合工业化的大型推广。

技术领域

本发明属于农业微生物学技术领域，具体涉及一种深海独岛枝芽胞杆菌培养基和剂型。

背景技术

植物寄生线虫能够寄生于植物各个组织，造成植物出现病症的一类病原动物。主要分为根结线虫、松材线虫、大豆孢囊线虫和茎线虫等，以根结线虫危害最为严重，在世界范围内广泛分布。蔬菜根结线虫(Meloidogyne spp.)严重危害我国蔬菜的安全生产，一般使蔬菜减产20％-30％，严重的达到75％。目前，国内尚无大量推广应用的抗根结线虫病的作物和蔬菜品种，对根结线虫病有效的生物防治措施缺乏。因此，开发对根结线虫病有效的生物防治制剂势在必行。

农业微生物杀菌剂主要包括活菌杀菌剂和农用抗生素两种类型。(1)活菌杀菌剂：包括细菌杀菌剂和真菌杀菌剂，细菌杀菌剂以芽胞杆菌(B.subtilis)为主，真菌杀菌剂主要是木霉属(Trichoderma)的一些种。(2)农用抗生素：农用抗生素是微生物发酵过程中产生的一类次级代谢产物，在较低浓度时就可以对植物的病原起抑制或杀灭作用，此外还能调节植物的生长发育。

农业微生物杀菌剂防效的影响因素包括生防菌活菌数，生产条件和贮存条件。(1)生防菌活菌数：活菌数是农业微生物杀菌剂的一项重要的质量指标，保证一定数量的活菌数是微生物杀菌剂发挥作用的基础。(2)生产条件：农业微生物杀菌剂生产条件包括微生物培养条件以及菌剂加工条件，如培养基的营养控制情况和微生物培养温度、pH值等。(3)贮存条件：对于液体菌剂的贮存，通过向微生物杀菌剂中添加适量的防腐剂也能有效抑制杂菌的生长，防止菌剂腐坏变质，从而延长货架期。

本发明中的独岛枝芽胞杆菌1A00493对根结线虫具有很好的杀线虫活性，但1A00493菌株原始培养基为2216e海水培养基，海水培养基成分复杂、成本较高、产芽胞周期长。

发明内容

本发明的目的是提供了一种独岛枝芽胞杆菌培养基，与原本2216e培养基相比，降低了成本，减少的培养基的复杂成分，提高了触杀南方根结线虫活性以及保留了较短的产芽胞天数，所述的独岛枝芽胞杆菌来源于中国海洋微生物菌种保藏管理中心，保藏编号：MCCC NO.1A00493。

本发明的另一个目的在于提供了独岛枝芽胞杆菌的发酵方法。

本发明最后一个目的在于提供了一种稳定的线虫杀虫剂。

为了达到以上目的，本发明采用以下技术措施：

一种独岛枝芽胞杆菌(Virgibacillus dokdonensis)发酵培养基，包括：鱼粉2-4％，葡萄糖0.5-1.5％，氯化钠2-3％，氯化镁0.07-0.08％，氯化钙.0.05-0.15％，柠檬酸铁0.01-0.02％，pH为7.5-9.5，其余为水；所述的独岛枝芽胞杆菌为：MCCC NO.1A00493。

以上所述的培养基，优选的，包括：鱼粉3％，葡萄糖1％，氯化钠1.5％，氯化镁0.075％，氯化钙0.1％，柠檬酸铁0.01％，以上均为质量百分比，pH为8.5，其余为水。