[发明专利]一种阴道分泌源性多肽及其在抑制白色念珠菌感染中的应用

说明书

本发明公开了一种阴道分泌源性多肽及其在抑制白色念珠菌感染中的应用，涉及生物技术领域，通过一种新型多肽PDMAC抑制白色念珠菌感染阴道上皮细胞。所述的多肽氨基酸序列为ATPTSTLRTAPPPKVLT，理论分子量为1751.06Da，理论等电点为11，不稳定系数49.74，脂肪系数74.71，亲水性为‑0.21，通过固相法合成，且在C端和N端分别通过聚乙二醇和氨甲酸进行化学修饰。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体为一种阴道分泌源性多肽及其在抑制白色念珠菌感染中的应用。

背景技术

外阴阴道念珠菌病(Vulvovaginal candidiasis,VVC)是最常见的女性外阴阴道炎症之一。统计表明，约75％的女性一生中至少患过一次VVC，45％的女性经历过两次或以上发病。长期患VVC，不但给患者的生活带来巨大烦恼，还将导致宫颈炎和宫颈糜烂、输卵管卵巢炎、盆腔炎，继发性不孕，生殖道恶性肿瘤等疾病；妊娠期妇女患VVC，有发生胎膜早破、早产、胎儿宫内感染、新生儿鹅口疮等风险。因此，VVC的预防和治疗是女性生殖道感染研究的重中之重。

VVC的主要致病菌为白色念珠菌，是一种上皮细胞内的寄生菌，具有菌丝相和酵母相两种形态。在人体内，白色念珠菌通常以非致病的酵母相存在于阴道、皮肤、口腔、上呼吸道及肠道，与宿主共生。当阴道正常菌群组成改变(应用广谱抗菌素)或全身及阴道局部免疫受到抑制时(妊娠、糖尿病、应用皮质类固醇激素等)，白色念珠菌转化为能够快速生长并破环宿主细胞的菌丝相粘附定植于阴道上皮细胞，随后在多种酶的作用下完成入侵阴道上皮细胞的过程；另外，白色念珠菌还可寄生于巨噬细胞内逃避机体免疫应答机制，导致局部白色念珠菌的迅速生长繁殖，打破阴道微生态平衡，最终导致以白色念珠菌为主，同时伴有棒状杆菌、类杆菌、葡萄球菌增多的混合感染。

目前VVC的治疗方案以局部短疗程使用抗真菌药物、恢复阴道正常菌群为主，但其临床疗效不如人意，仍有许多患者在接受规范化抗真菌治疗后出现反复发作的外阴阴道念珠菌病(Recurrent vulvovaginal candidiasis，RVVC)，且易产生耐药。近年来，针对VVC开发新型药物时有报道，如：棘白菌素可以非竞争性抑制白色念珠菌细胞壁多糖——β-(1,3)-D-葡聚糖的生物合成，破环细胞壁完整性，从而达到杀菌目的；小檗碱、丁香罗勒等植物类提取物可阻断白色念珠菌利用L-甲基-蛋氨酸合成细胞膜重要组分麦角甾醇、且可抑制白色念珠菌由酵母相转为菌丝相，降低其致病能力；Histatin、BM2等阳离子多肽可结合白色念珠菌细胞膜磷脂双分子层外部的酸性磷脂、脂多糖，破环脂质双分子层结构而达到抑制白色念珠菌生长繁殖的目的。

生物体内存在多种具有生理活性的多肽，与感染、免疫调节、肿瘤病变等密切相关。阴道分泌物检查是目前妇产科疾病诊断中的常规检查手段，具有方便、快捷、无创的优势。而女性阴道分泌物主要由前庭大腺、宫颈腺体、子宫内膜的分泌物和阴道粘膜的渗出液、阴道菌群、脱落的阴道上皮细胞混合而成，行使物理屏障、菌群平衡、免疫应答等功能，从而起到对机体的抗菌和保护作用。阴道分泌物中存在近千种抗菌的内源性多肽，且广泛受到激素水平(卵泡期、黄体期、月经期、妊娠期、围绝经期等)的影响，这为理解阴道分泌物的功能提供了一定的分子基础，但阴道分泌物的成分和作用机理复杂，继续挖掘其中新的保护成分和机制成为了一条有效的途径。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新型阴道分泌源性多肽PDMAC，氨基酸序列为ATPTSTLRTAPPPKVLT，具有分子量低、亲脂性好、易于入胞与入核等优点。

本发明的另一目的是提供多肽PDMAC在抑制白色念珠菌感染阴道上皮细胞中的应用，通过调控Beclin-1的表达来影响阴道上皮细胞的自噬功能，从而增强其清除入侵胞内白色念珠菌的作用。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种阴道分泌源性多肽，所述的多肽氨基酸序列为ATPTSTLRTAPPPKVLT。