[发明专利]肌酸激酶同工酶MB检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明提供了一种肌酸激酶同工酶MB检测试剂盒及其制备方法。具体地，所述试剂盒包括肌酸激酶同工酶MB检测试剂卡，所述试剂卡包括：预加样部件和测试条；其中，所述预加样部件包括加样容器和预加在所述加样容器内的肌酸激酶同工酶MB单克隆抗体‑荧光微球偶联物；所述测试条包括：测试条底板，以及设置在所述测试条底板上的上样部件、检测部件和吸液部件；和所述检测部件包括层析基质和分别设置的检测带和质控带，其中，所述检测带包被有肌酸激酶同工酶CK‑MB多克隆抗体，且所述质控带包被有IgG多克隆抗体。本发明的试剂盒操作简单、成本低且重复性好、准确度高。

技术领域

本发明涉及荧光免疫层析检测领域，更具体地涉及使用荧光免疫层析法，定量检测临床样本中CK-MB的试剂盒。

背景技术

急性心肌梗死(AMI)已经成为威胁人类生命的主要疾病之一，目前全球每年有1700万人死于心血管疾病，其中有一半以上死于急性心肌梗死，AMI过程中心肌细胞中的酶，如肌酸激酶(CK)在血清中活性增高，可广泛应用于AMI的诊断。

肌酸激酶(CK)是由脑型亚单位B和肌型亚单位M组成的二聚体，每个亚单位的分子量都约为43kDa，M亚基与B亚基在一级结构上的同源性达80％，在高级结构上会形成3中二聚体，有CK-MM、CK-BB、CK-MB三种同工酶。人体很多组织中都含有肌酸激酶，但是每一种同工酶的分布都不一样，骨骼肌中富含有CK-MM型同工酶，脑、胃、小肠、膀胱及肺主要含有CK-BB同工酶，而CK-MB型同工酶仅存在于心肌组织中。CK-MB同工酶诊断透壁型心肌梗死的敏感性及特异性均极高，CK-MB在正常条件下其表达水平较低，在发病后4-8小时CK-MB从受损细胞排出并迅速开始在血液中增加，在12-24小时后达到最高水平，并在24-48小时内恢复正常。若CK-MB同工酶在急性心肌梗死(AMI)后仍保持高水平，表明心肌坏死还在进行；若恢复正常后再次升高，表明原梗死部位扩展或者新的梗死部位出现。因此，定量检测血液中CK-MB型同工酶水平，对心肌梗死的诊断及心肌手术后的效果监测有着极高的医学价值。目前，CK-MB同工酶的定量诊断主要是基于化学发光的大型仪器，这些方法成本高、操作复杂，检测时间较长，且多是依赖于国外进口，昂贵的成本导致医院检测价格居高不下。

所以，本领域急需提供操作简单、成本低、重复性好、准确度高的CK-MB检测试剂盒。

发明内容

本发明的目的是提供一种操作简单、成本低、重复性好、准确度高的CK-MB检测试剂盒。

本发明第一方面，提供了一种肌酸激酶同工酶MB检测试剂卡，所述试剂卡

包括：

预加样部件和测试条；

其中，所述预加样部件包括加样容器和预加在所述加样容器内的肌酸激酶同工酶MB单克隆抗体-荧光微球偶联物；

所述测试条包括：测试条底板，以及设置在所述测试条底板上的上样部件、检测部件和吸液部件；和

所述检测部件包括层析基质和分别设置的检测带和质控带，其中，所述检测带包被有肌酸激酶同工酶CK-MB多克隆抗体，且所述质控带包被有IgG多克隆抗体。

在另一优选例中，预加的所述肌酸激酶同工酶MB单克隆抗体-荧光微球偶联物为通过将溶液A滴加在所述加样容器内干燥后形成的固相混合物，所述溶液A包括：

(a)缓冲液，所述缓冲液包括：PB 10-50mM、甘油0.5-5wt％、海藻糖或蔗糖0.5-5wt％、防腐剂0.01-0.4wt％，且pH为6.0-9.5；和

(b)经封闭的肌酸激酶同工酶MB单克隆抗体-荧光微球偶联物。

在另一优选例中，所述防腐剂选自下组：Proclin、NaN₃，或其组合。