[发明专利]一种用于检测单链核酸的ECL传感器、其套件及其方法

权利要求书

1.一种用于检测单链核酸的ECL传感器，其特征在于，所述ECL传感器包括有电极基底以及负载于所述电极基底上的发光体，所述发光体结合有具有发夹结构的第一核酸；

所述第一核酸能够被待测核酸互补结合并形成单链结构进而能够互补结合第二核酸，所述第二核酸标记有用于催化底物产生酶促反应产物的酶；

所述酶促反应产物能够作为猝灭剂减弱所述发光体在第一扫描电位下的第一信号值ECL-1，同时作为共反应物增强所述发光体在第二扫描电位下的第二信号值ECL-2；通过ECL-1和ECL-2的比率计算待测核酸的水平；

所述酶促反应产物为H₂O₂；

所述发光体为聚（9,9-二-正辛基芴基-2,7-二基）聚合物纳米颗粒。

2.一种用于检测单链核酸的ECL传感器套件，其特征在于，其包括有：如权利要求1所述的用于检测单链核酸的ECL传感器以及如下组分：所述第二核酸、用于催化产生酶促反应产物的酶以及底物。

3.根据权利要求2所述的用于检测单链核酸的ECL传感器套件，其特征在于，所述用于催化产生酶促反应产物的酶选自：葡萄糖氧化酶、胆固醇氧化酶和乳酸氧化酶中的至少一种，所述底物选自：葡萄糖、胆固醇和乳酸中的至少一种。

4.根据权利要求2所述的用于检测单链核酸的ECL传感器套件，其特征在于，所述ECL传感器套件还包括有第三核酸；

所述第三核酸能够与所述第二核酸互补结合并与所述第二核酸发生杂交链式反应。

5.根据权利要求4所述的用于检测单链核酸的ECL传感器套件，其特征在于，所述第三核酸标记有用于催化底物产生所述酶促反应产物的酶。

6.根据权利要求4所述的用于检测单链核酸的ECL传感器套件，其特征在于，所述待测核酸包括待检测的第一目标核酸和/或由待检测的第一目标核酸通过链置换反应产生的第二目标核酸；

当所述待测核酸包括第二目标核酸时，所述ECL传感器套件还包括用于引发待检测的第一目标核酸发生链置换扩增反应以产生第二目标核酸的模板核酸。

7.根据权利要求6所述的用于检测单链核酸的ECL传感器套件，其特征在于，当所述第一目标核酸为miRNA-155时，所述模板核酸的碱基序列如SEQ ID No.5所示，第二目标核酸的碱基序列如SEQ ID No.6所示，所述第一核酸、所述第二核酸和所述第三核酸的碱基序列分别如SEQ ID No.7~9所示。

8.一种检测单链核酸的方法，其特征在于，其包括采用如权利要求1所述的用于检测单链核酸的ECL传感器或如权利要求2~7任一项所述的用于检测单链核酸的ECL传感器套件对待测核酸进行检测。

9.根据权利要求8所述的检测单链核酸的方法，其特征在于，所述方法包括：

步骤a）将所述待测核酸加入到所述ECL传感器上，以使所述待测核酸与所述第一核酸互补结合从而使所述第一核酸形成单链结构；

步骤b）在所述ECL传感器上加入第二核酸，以使第一核酸与所述第二核酸结合；

步骤c）再在所述ECL传感器中加入底物，以使底物被酶催化产生酶促反应产物；

步骤d）在所述第一扫描电位下，扫描发光体，获得第一信号值ECL-1；在所述第二扫描电位下，扫描发光体，获得第二信号值ECL-2；通过ECL-1和ECL-2的比率计算待测核酸的水平。

10.根据权利要求9所述的检测单链核酸的方法，其特征在于，所述第一扫描电位为0～+（1.20～1.30）V；所述第二扫描电位为0～+（1.90～2.10）V。

11.根据权利要求9所述的检测单链核酸的方法，其特征在于，所述方法包括在步骤b）中加入第三核酸，以使所述第二核酸和所述第三核酸互补结合并发生杂交链式反应。