[发明专利]芳香族异戊烯基转移酶突变体、用于其表达的重组菌的构建方法及由其构建的重组菌有效
申请号: | 202010776355.5 | 申请日: | 2020-08-05 |
公开(公告)号: | CN113355300B | 公开(公告)日: | 2022-04-01 |
发明(设计)人: | 杜德尧;尹进;王高艳;张倩;李腾;张浩千 | 申请(专利权)人: | 深圳蓝晶生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/42;C12R1/19 |
代理公司: | 北京金信知识产权代理有限公司 11225 | 代理人: | 李雪芹;徐琳 |
地址: | 518057 广东省深圳市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 芳香族 戊烯 转移酶 突变体 用于 表达 重组 构建 方法 | ||
1.一种芳香族异戊烯基转移酶突变体,其氨基酸序列为SEQ ID No.34。
2.一种质粒,其包含如权利要求1所述的芳香族异戊烯基转移酶突变体的编码序列。
3.一种构建重组菌的方法,所述方法包括以下步骤:
1)以大肠杆菌BW25113为出发菌株将MVA途径所需的基因导入其基因组中以获得底盘菌;
2)构建包含如权利要求1所述的芳香族异戊烯基转移酶突变体的编码序列的质粒;
3)将步骤2)中构建的质粒导入步骤1)获得的底盘菌中即得到所述重组菌。
4.根据权利要求3所述的方法,其中,所述MVA途径所需的基因包括:乙酰乙酰-CoA硫解酶、HMG合酶、3-羟基-3-甲基戊二酰-CoA还原酶、MVA激酶、磷酸MVA激酶、MVA二磷酸脱羧酶、IPP异构酶和ERG20或它们各自的同功酶的编码基因。
5.根据权利要求3所述的方法,进一步包括向所述重组菌中额外导入大麻二酸合酶。
6.一种根据权利要求3或4所述的方法构建的重组菌。
7.如权利要求6所述的重组菌用于发酵生产大麻萜酚酸的用途。
8.一种生产大麻萜酚酸的方法,其中,所述方法包括采用如权利要求6所述的重组菌发酵生产大麻萜酚酸。
9.一种生产大麻素类化合物的方法,包括使用大麻萜酚酸作为原料合成所述大麻素类化合物的步骤,其中,所述大麻萜酚酸采用如权利要求6所述的重组菌发酵生产。
10.根据权利要求9所的方法,其中,所述大麻素类化合物包括大麻二酸、四氢大麻酚酸、大麻色素羧酸、大麻酸、大麻萜酚、大麻二酚、四氢大麻酚、大麻环萜酚或大麻酚。
11.一种根据权利要求5所述的方法构建的重组菌。
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