[发明专利]一种鉴定棉花受碱胁迫程度的方法

权利要求书

1.一种鉴定棉花受碱胁迫程度的方法，包括如下步骤：

1)以沙培法种植棉花幼苗至三叶期，将三叶期的棉花幼苗洗净，分别移栽到含有水和25、50、75mmol·L^–1Na₂CO₃溶液的锥形瓶中培养24h后，观察叶色变化；

2)采集步骤1)中棉花幼苗叶片，从叶片中提取花青素，测定不同碱浓度下花青素的总含量；

3)以Na₂CO₃溶液的浓度为横坐标，以测得的棉花叶片中花青素的总含量为纵坐标，绘制碱浓度-花青素总含量的标准曲线；

4)采集待鉴定棉花三叶期幼苗叶片，观察叶片颜色，与步骤1)中的不同浓度碱处理后的叶片颜色进行对比，预估其受碱胁迫程度，然后参照步骤2)的操作从叶片中提取花青素，测定花青素的总含量；将得到的花青素的总含量代入步骤3)中的标准曲线中，计算得到对应的碱浓度，即，棉花受碱胁迫程度。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)的操作为：采集步骤1)中棉花幼苗叶片，剪碎，加入HCl体积分数为1％的甲醇溶液，于4℃黑暗条件下放置24h至叶片完全发白，用含有1％HCl的甲醇溶液作为空白对照，测定所得溶液在530nm和657nm处的吸光值，得到棉花叶片中花青素的含量；

其中，所述棉花叶片与含有1％HCl的甲醇溶液的配比为：0.1g：0.6mL。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述方法进一步包括采用液质联用定性分析碱胁迫下花青素成分的变化，结合生物信息学分析确定影响叶色变化的主要成分。

4.权利要求1-3中任一项所述方法在选育耐碱胁迫棉花品种中的应用。

5.花青素在选育耐碱胁迫棉花品种中的应用。