[发明专利]病毒检测试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种病毒检测试剂盒及其应用，其中，该病毒检测试剂盒包括核酸释放剂及RNA‑cDNA‑RNA＊反应缓冲液，所述核酸释放剂包括1％SDS盐溶液及蛋白酶K；所述RNA‑cDNA‑RNA＊反应缓冲液包括dNTPs、荧光NTPs溶液，T7‑GGG‑COVID‑19特异性引物及T7反义寡核苷酸。本发明的病毒检测试剂盒可以用于新型冠状病毒(COVID‑19)的检测，并具有如下优点：其一、仅需简单的样品温控设备和荧光检测系统，可简化原有的RT‑PCR仪器需求，降低仪器成本和增加仪器便携程度，解决了检测工具方面的问题；其二、传统核酸检测包括了反转录、荧光定量扩增和检测等多重操作，耗时长，操作复杂，本技术采用恒温以DNA为模板酶促RNA转录扩增方法，整个检测过程不到半小时，极大地提升了检测效率，解决了检测周期长的问题。

技术领域

本发明属于生物检验检疫技术领域，具体涉及一种病毒检测试剂盒及 其应用。

背景技术

新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019，COVID-19)，简称新 冠肺炎，是新近发现的一种正义单链线性RNA病毒，属于冠状病毒β属。 与之同属还包括中东呼吸综合征(MERS)冠状病毒和严重急性呼吸综合征 (SARS)冠状病毒。COVID-19的RNA基因组包含近29 000个核苷酸，编码 至少27个蛋白质，其中包括15种非结构蛋白、4种结构蛋白(S、N、E和M)，以及8种辅助蛋白(3a、3b、p6、7a、7b、8b、9b和orf14)。COVID- 19与SARS-CoV的核苷酸同源性高达82％，其感染宿主细胞的机制也非常相 似，都是通过S蛋白与宿主细胞表面的血管紧张素转换酶2(ACE2)受体结 合并与宿主细胞膜融合，从而进入细胞内部。

COVID-19主要通过直接传播、气溶胶传播和接触传播方式，引起患者发 烧、乏力、咳嗽等呼吸道症状，病情加重后发展为呼吸困难、急性呼吸衰 竭，其他一系列严重并发症，甚至死亡。地理传播之广，病例突增之迅速， 致死人数之多，让全球公共卫生面临极为紧迫而巨大的挑战，造成全球社 会、经济和政治空前危机。2020年3月11日，世界卫生组织将COVID-19 疫情评估为全球大流行(pandemic)，呼吁各国通力协作拯救生命。再此危 难中，利用科学的力量控制疫情显得极为重要。

目前COVID-19没有特效药，也没有疫苗。中国为了能够有效遏制疫情， 采取了早检测、早隔离、早治疗，应收尽收，以及减少人际接触和跨城出 行等手段，成功的快速扭转了病例增速。新加坡和韩国没有封锁城市，也 成功的遏制了疫情的蔓延。在这些国家成功的背后，有一个共通的值得借 鉴的关键经验，那就是检测和隔离。尽早地、大规模而快速的检测是重中 之重。目前对COVID-19的检验手段主要分为核酸检测法和免疫学检测法。 核酸检测法是对COVID-19的RNA基因组进行检测，包括荧光定量PCR、基 因测序、微滴式数字PCR、基因芯片测序和环介导等温扩增(LAMP)等技术。 免疫学检测法是对COVID-19病毒抗原或人体免疫反应产生的特异性抗体进 行检测，包括免疫色谱试纸条、酶联免疫吸附试验(ELISA)和化学发光免 疫分析(CLIA)等技术。虽然已有大量检测产品研发并得到推广，但在实 际临床检测上不少国家仍面临着检测能力“跟不上”的困境，究其原因， 主要是存在检测周期长、灵敏度低、检测工具和人力不足、检测成本高昂 等缺陷。针对以上问题，本申请的发明人团队开发了一种快速检测新冠肺 炎的检测技术，致力于攻克检测难关，推动临床大规模的诊断进程。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此， 本发明的目的在于提出一种病毒检测试剂盒及其应用。

为实现上述目的，根据本发明的第一个方面，本发明提供的病毒检测 试剂盒，包括：

核酸释放剂，所述核酸释放剂包括1％SDS盐溶液及蛋白酶K；