[发明专利]一组与小麦粒重相关的KASP引物组及其应用

权利要求书

1.一组与小麦粒重相关的KASP引物组在检测小麦粒重中的应用，其特征在于，所述KASP引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示的F1引物、核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示的F2引物、核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的通用引物；携带T优势等位变异的小麦样品粒重高于携带C非优势等位变异的小麦样品；

所述小麦为以宁麦9号和扬麦158为亲本构建的重组自交系群体。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤如下：利用所述KASP引物组配制成PCR检测体系并对样品小麦DNA进行PCR扩增，同时以扬麦158与宁麦9号作为对照，然后利用荧光分析仪对样品小麦PCR扩增产物进行基因分型；携带T优势等位变异的小麦样品粒重高于携带C非优势等位变异的小麦样品。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述PCR检测体系为5μL，包含2×KASPMaster Mix 2.5μL、KASP Assay Mix 0.07μL、浓度为20 ng/μL的模板DNA 2.43μL；

其中，每100μL的KASP Assay Mix配制方法如下：100μM 的所述F1引物12μL、100μM 的所述F2引物 12μL 、100μM的所述通用引物 30μL、ddH₂O补足至100μL；

PCR扩增程序为：第一步：94℃，15 min；第二步：94℃，20 s，61~55℃，1 min，每个循环降低0.6℃，共进行10个循环；第三步：94℃，20 s，55℃，1 min，共进行26个循环。