[发明专利]一种用于鉴定小麦籽粒过氧化物酶活性的分子标记及其应用有效

专利信息
申请号: 202010782791.3 申请日: 2020-08-06
公开(公告)号: CN111733281B 公开(公告)日: 2022-12-02
发明(设计)人: 耿洪伟;夏先春;严勇亮;王丽丽;王继庆;战帅帅;任毅 申请(专利权)人: 新疆农业大学;中国农业科学院作物科学研究所
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12N15/11
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 白艳
地址: 830052 新疆维吾尔*** 国省代码: 新疆;65
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摘要:
搜索关键词: 一种 用于 鉴定 小麦 籽粒 过氧化物 活性 分子 标记 及其 应用
【权利要求书】:

1.用于鉴定小麦POD活性的成套引物,由引物对1、引物对2和引物对3组成;

所述引物对1为由序列1所示的单链DNA和序列2所示的单链DNA组成的引物对;

所述引物对2为由序列3所示的单链DNA和序列4所示的单链DNA组成的引物对;

所述引物对3为由序列5所示的单链DNA和序列6所示的单链DNA组成的引物对。

2.用于鉴定小麦POD活性的PCR试剂或含有所述PCR试剂的试剂盒,

所述PCR试剂为由PCR试剂1、PCR试剂2和PCR试剂3组成的成套试剂;

或所述PCR试剂为PCR试剂1或PCR试剂2或PCR试剂3;

所述PCR试剂1包括权利要求1所述成套引物中的所述引物对1;

所述PCR试剂2包括权利要求1所述成套引物中的所述引物对2;

所述PCR试剂3包括权利要求1所述成套引物中的所述引物对3。

3.权利要求1所述的成套引物或权利要求2所述的PCR试剂或所述试剂盒在如下任一中的应用:

(d1)鉴定或辅助鉴定待测小麦为高POD活性小麦还是低POD活性小麦;

(d2)鉴定或辅助鉴定低POD活性小麦品种;

(d3)鉴定或辅助鉴定高POD活性小麦品种;

(d4)比较或辅助比较不同待测小麦POD活性高低;

(d5)鉴定或辅助鉴定待测小麦是携带TaPod-A3a等位基因、TaPod-A3b等位基因还是TaPod-A3c等位基因;

(d6)鉴定或辅助鉴定携带TaPod-A3a等位基因的小麦品种;

(d7)鉴定或辅助鉴定携带TaPod-A3b等位基因的小麦品种;

(d8)鉴定或辅助鉴定携带TaPod-A3c等位基因的小麦品种;

(d9)培育高POD活性小麦或培育低POD活性小麦;

所述低POD活性小麦中的POD活性小于等于2.51×103U·g-1·min-1

所述高POD活性小麦中的POD活性大于2.51×103U·g-1·min-1

单位POD活性(U)被定义为每克全麦粉每分钟反应产物在470nm处的吸光度增加0.01;

待测小麦携带TaPod-A3a等位基因是指用权利要求1所述的成套引物中的所述引物对1、所述引物对2和所述引物对3分别对待测小麦的基因组DNA进行PCR扩增,若引物对1的PCR扩增产物含有大小为216bp的片段,且引物对2的PCR扩增产物不含有大小为882bp的片段,且引物对3的PCR扩增产物不含有大小为156bp的片段,则待测小麦基因组中携带等位基因TaPod-A3a;

待测小麦携带TaPod-A3b等位基因是指用权利要求1所述的成套引物中的所述引物对1、所述引物对2和所述引物对3分别对待测小麦的基因组DNA进行PCR扩增,若所述引物对2的PCR扩增产物含有大小为882bp的片段,且引物对1的PCR扩增产物不含有大小为216bp的片段,引物对3的PCR扩增产物不含有大小为156bp的片段,则待测小麦基因组中携带等位基因TaPod-A3b;

待测小麦携带TaPod-A3c等位基因是指用权利要求1所述的成套引物中的所述引物对1、所述引物对2和所述引物对3分别对待测小麦的基因组DNA进行PCR扩增,若所述引物对3的PCR扩增产物含有大小为156bp的片段,且引物对1的PCR扩增产物不含有大小为216bp的片段,且引物对2的PCR扩增产物不含有大小为882bp的片段,则待测小麦基因组中携带等位基因TaPod-A3c。

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