[发明专利]口蹄疫病毒样颗粒、制备方法、疫苗组合物和应用

说明书

本发明公开了一种口蹄疫病毒样颗粒、制备方法、疫苗组合物和应用。本发明的口蹄疫病毒样颗粒是由口蹄疫病毒的结构蛋白VP4、VP2、VP3、VP1构成，结构稳定，不仅温度稳定性及酸性环境稳定性增加，而且制备的疫苗组合物能快速形成特异性抗体，免疫持续期显著增长，能维持更长时间的免疫保护。

本申请为专利申请201510185811.8的分案申请，原案发明名称为“口蹄疫病毒样颗粒、制备方法、疫苗组合物和应用”，原案申请日为2015年4月17日。

技术领域

本发明涉及兽用生物制品领域，更具体地，本发明涉及口蹄疫病毒样颗粒、制备方法、由该病毒样颗粒制备的疫苗组合物和应用。

背景技术

口蹄疫(FMD)为一种急性、高度接触传染性和可快速远距离传播的动物疾病，是哺乳类动物中感染性最强的疾病，其中偶蹄类动物染病更会造成全球重大的经济损失。遭受口蹄疫危害的动物包括牛、羊、山羊和猪。致病因子，口蹄疫病毒(FMDV)，是小核糖核酸病毒属家族的一种口疮病毒。该病毒分为7个血清型(A、O、C、Asia1、SAT1、SAT2、和SAT3型)，其中我国主要流行O型、Asia1和A型口蹄疫病毒。疫苗免疫是控制此病、保护家畜免受危害的有效措施。

病毒样颗粒(VLPs)是一种在体外和/或体内表达时能够自主包装成病毒外壳结构的类病毒粒子，它们是具有病毒的相似外壳结构但不具有病毒复制能力的假病毒。VLPs疫苗能有效地激发机体产生抗感染，抗肿瘤免疫，基于病毒样颗粒设计的疫苗是一种较为理想的疫苗形式。目前研究较多的口蹄疫病毒样颗粒是由口蹄疫结构蛋白VP0、VP3和VP1构成，然而，利用该方法制备的口蹄疫病毒样颗粒结构不稳定，活性降低，不能很好的诱导机体产生有效的免疫反应。

此外，口蹄疫病毒易发生变异，尤其是我国流行的O型口蹄疫病毒CATHAY型变异株，其抗原发生较大变异，原有疫苗对其保护力明显下降，加之自身免疫原性较弱，不能诱导动物机体产生足够的免疫力。因此，筛选理想的毒株序列制备病毒样颗粒是当务之急，也符合国家提出的有效防控重大动物疫病，保障畜牧业健康可持续发展的需要。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术缺陷，提供一种抗口蹄疫的疫苗组合物，所述疫苗组合物包含O型口蹄疫病毒样颗粒和/或亚洲1型口蹄疫病毒样颗粒和/或A型口蹄疫病毒样颗粒和佐剂，其中，O型口蹄疫病毒样颗粒由O型口蹄疫病毒结构蛋白VP4、VP2、VP3和VP1构成，亚洲1型口蹄疫病毒样颗粒由亚洲1型口蹄疫病毒结构蛋白VP4、VP2、VP3和VP1构成，A型口蹄疫病毒样颗粒由A型口蹄疫病毒结构蛋白VP4、VP2、VP3和VP1构成。

优选地，本发明提供的O型口蹄疫病毒的结构蛋白VP4氨基酸序列为SEQ ID NO.1，VP2氨基酸序列为SEQ ID NO.2，VP3氨基酸序列为SEQ ID NO.3，VP1氨基酸序列为SEQ IDNO.4。

优选地，本发明提供的O型口蹄疫病毒的结构蛋白VP4氨基酸序列为SEQ ID NO.5，VP2氨基酸序列为SEQ ID NO.6，VP3氨基酸序列为SEQ ID NO.7，VP1氨基酸序列为SEQ IDNO.8。

优选地，本发明提供的O型口蹄疫病毒的结构蛋白VP4氨基酸序列为SEQ ID NO.9，VP2氨基酸序列为SEQ ID NO.10，VP3氨基酸序列为SEQ ID NO.11，VP1氨基酸序列为SEQ IDNO.12。

优选地，本发明提供的O型口蹄疫病毒的结构蛋白VP4氨基酸序列为SEQ IDNO.13，VP2氨基酸序列为SEQ ID NO.14，VP3氨基酸序列为SEQ ID NO.15，VP1氨基酸序列为SEQ ID NO.16。

优选地，本发明提供的O型口蹄疫病毒的结构蛋白VP4氨基酸序列为SEQ IDNO.17，VP2氨基酸序列为SEQ ID NO.18，VP3氨基酸序列为SEQ ID NO.19，VP1氨基酸序列为SEQ ID NO.20。