[发明专利]一株具有跨种裂解能力的弧菌噬菌体及其应用

说明书

本发明公开了一株具有跨种裂解能力的弧菌噬菌体及其应用。所述具有宽裂解谱的弧菌噬菌体，拉丁名为Vibrio parahaemolyticus，被命名为vB_VpaS_PG28，保藏编号为CGMCC NO.16393，于2018年9月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物学中心；优选地，所述弧菌噬菌体能够裂解副溶血弧菌和溶藻弧菌，上述噬菌体对副溶血弧菌和溶藻弧菌具有高效的跨种裂解活性，所述噬菌体单次泼洒养殖水体后，能够显著降低水体中副溶血弧菌的数量；将噬菌体拌料后饲喂或将对虾浸浴噬菌体，能够有效预防和治疗由副溶血弧菌引起的感染，提高对虾成活率。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一株具有跨种裂解特征的宽裂解谱的副溶血弧菌噬菌体及其应用。

背景技术

副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是革兰氏阴性嗜盐菌，其菌体呈杆状、弧状或丝状，大部分菌体在液体培养基中有单端鞭毛和侧鞭毛，能运动并可以黏附。副溶血弧菌可游离在水中，也可附着在活动或静止的物体上，如浮游动物、鱼类、贝类及悬浮颗粒的表面，是一种在海洋和河口环境中常见的细菌。副溶血弧菌可在10～44℃(最适温度35～37℃)、pH＝5～11、NaCl含量为3～8％的条件下生长。溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)是革兰氏阴性嗜盐菌，其菌体呈短杆状，无芽孢、荚膜,单独存在或尾端相连成“C”或“S”形，兼性厌氧海生弧菌,适宜温度为17～35℃。

副溶血弧菌常常从海产品中分离出来，普遍存在于对虾、蟹类、牡蛎、贻贝和蛤蜊等海产品中，其中对虾养殖时受到副溶血弧菌的影响尤为明显。副溶血弧菌是急性肝胰腺坏死综合征(AHPND，acute hepatopancreatic necrosis disease)的致病菌，是对虾养殖场一种新型的爆发性的病害，即早期死亡综合征(EMS，early mortality syndrome)。该病最早于2009年在中国海南首次报道，主要危害南美白对虾和斑节对虾，具有致死率高、发病急、传染性强等特点。该病害已经对国内及全球对虾养殖业造成巨大冲击，使得对虾产量急剧下降并造成了严重的经济损失。

溶藻弧菌广泛分布于世界各地海水及河口处，并且数量居海水类弧菌之首,但其为嗜温菌，从夏季到冬季,由赤道向两极随着温度的降低其数量也明显减少。另外,溶藻弧菌也大量分布在海洋动物中，是鱼、虾、贝等海水养殖动物的条件致病菌。

目前，对弧菌疾病的防治方法多停留在改良养殖环境、改善虾苗的抗病性、使用化学性药物和抗生素进行预防和治疗等方面。随着抗生素及化学药物的大量使用，水体严重污染，水产品的品质明显降低。近年来，人们更倾向采用生物方法进行防治，噬菌体制剂得到大力发展。

噬菌体(Bacteriophage，Phage)是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物病毒的总称，其体积微小、结构简单，不具备细胞结构，只能寄生生活，分布十分广泛，凡是细菌存在之处几乎都有相应的噬菌体。利用噬菌体制剂在治疗细菌性水产养殖疾病方面有诸多优势：

1)对细菌耐药性适应性强，虽然细菌也会对噬菌体产生抗性，然而噬菌体能够适应宿主生物的变异，从而裂解宿主菌；

2)专一性强，噬菌体只针对其特定的细菌病原菌作为宿主，不会破坏正常菌群；

3)无残留、无毒害，噬菌体具有宿主依赖性，随宿主的清除而消亡，不会残留在动物体内，而且噬菌体的降解终产物为氨基酸和核苷酸对人和动物无影响。

目前，关于副溶血弧菌噬菌体的应用，仅见于对食品表面和器具表面的消毒，将副溶血弧菌噬菌体制剂用作养殖环境水体消毒、饲料添加剂等还未见报道。此外，公开的副溶血弧菌噬菌体都具有相同的缺点，即裂解谱较窄，不具备跨种裂解的特点。

发明内容