[发明专利]一种鸡蛋中多西环素残留的LC-MS测定方法

说明书

本发明公开了一种鸡蛋中多西环素残留的LC‑MS测定方法，该方法包括样品提取纯化、标准工作溶液的配制、测定和结果计算等步骤，其中，色谱柱为C18；流动相A为0.05‑0.5％甲酸水溶液，流动相B为乙腈溶液，梯度洗脱；采用ESI离子源，正离子模式扫描，多离子反应监测模式测定，多西环素母离子的质荷比为445.0，二级质谱检测的子离子的质荷比为154和428，相应的碰撞电压分别为37eV和29eV。该方法平均回收率为78.51％～108.82％，平均相对标准偏差(RSD)为5.96％～11.07％，检出限仅为0.5μg/kg，定量限仅为0.5μg/kg，具有操作简便、快速、准确、灵敏度高及重复性好等优点。

技术领域

本发明涉及一种鸡蛋中多西环素残留的测定方法，更具体地说是采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)定性定量测定鸡蛋中多西环素残留的方法，属于兽药残留检测技术领域。

背景技术

鸡蛋富含优质蛋白质及维生素，有很高的营养价值，是深受大众喜爱的美食。我国是鸡蛋生产和消费大国，据统计，2019年禽蛋产量3309万吨，其中鸡蛋占比约90％，雄踞世界第一。因此，鸡蛋的质量安全一直备受消费者的关注。

兽药残留是影响鸡蛋质量安全的重要因素。在蛋鸡的饲养过程中，不少养殖户或由于经济利益的驱使，或不懂科学用药知识，随意使用抗生素用于抗菌促生长，造成抗生素在鸡蛋中残留超标，留下食品安全隐患。多西环素(强力霉素)是在蛋鸡养殖中使用较多的一种四环素类药物，近年来，有关鸡蛋中多西环素残留超标的现象时有发生。吕冰峰等汇总了2018年鸡蛋国家食品安全监督抽检结果，结果发现抽检的1310批次鸡蛋中，检出不合格样品77批次，总体不合格率为5.88％。孙言凤等分析了2016-2018年湖北地区鸡肉和鸡蛋中四环素类抗生素残留情况，结果发现，抽检的538样品中四环素类抗生素的检出率为15.61％，其中强力霉素是鸡肉和鸡蛋样品中检出率最高且唯一超标的项目。杨欢春等2016-2017在宁夏随机抽取了8个市、县(区)市售鸡蛋和鸡肉样品共124份，结果发现鸡蛋和鸡肉中四环素类抗生素残留现状不容忽视，其中鸡蛋中强力霉素超标率为13.5％。据报道，2017年11月5日，南阳市畜牧局在开展兽药、饲料、畜产品质量安全抽检活动中发现，城乡一体化示范区新湾镇李某的养鸡场当日生产的鸡蛋检出多西环素。

残留检测是发现、查处动物源性食品残留超标的重要手段，是执法机关科学执法的技术保障。目前，已有很多方法用于鸡蛋中多西环素的残留检测。王旭丹等建立了同时检测鸡蛋中土霉素、四环素、金霉素和多西环素4种四环素类药物残留的高效液相色谱法，方法的检出限为10ng/g，定量限为50ng/g，平均回收率为67.3％～81.4％。吴宁鹏等建立了鸡蛋中土霉素、四环素、金霉素、多西环素残留量测定的高效液相色谱法，方法的检出限为10μg/kg,定量限为50μg/kg，平均回收率为60％～110％。卜晓娜等综述了动物源性食品中四环素类药物残留的色谱和质谱检测技术的研究进展。从中我们可以看到，目前对四环素类残留检测的大部分集中于猪肉、鸡肉、鱼肉、蜂蜜等动物可食性组织；所检测的对象主要集中在土霉素、金霉素和四环素；用于检测鸡蛋中多西环素残留的HPLC-MS方法很少且检出限较高、准确度较低，不能满足当前对鸡蛋中多西环素残留检测的需求。

因此建立简便、快速、准确、耐用、能准确定性和定量分析鸡蛋中多西环素残留量的LC-MS/MS检测方法具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种鸡蛋中多西环素残留的LC-MS/MS测定方法，旨在提高鸡蛋中多西环素残留检测的检出限和准确性，以及提高检测效率。

为实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：

一种鸡蛋中多西环素残留的LC-MS测定方法，该方法包括以下步骤：

(1)样品提取纯化