[发明专利]木聚糖酶基因、重组质粒、重组菌株、木聚糖酶及其应用

说明书

本发明公开一种木聚糖酶基因、重组质粒、重组菌株、木聚糖酶及其应用，所述木聚糖酶基因xyn1923的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；所述木聚糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；所述重组质粒携带所述木聚糖酶基因xyn1923；所述重组菌株包含所述木聚糖酶基因xyn1923。本发明提供的木聚糖酶的最适pH为7.0，在pH6.0至9.0环境下孵育16h，依然能够保持80％以上的剩余酶活力，最适温度为70℃，并且在60℃处理30min后，依然能够保持89％的剩余酶活力，具有较佳的耐热耐碱性能，在造纸和动物饲料方面具有较好的应用前景。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及一种木聚糖酶基因、重组质粒、重组菌株、木聚糖酶及其应用。

背景技术

木聚糖是自然界中除纤维素以外最丰富的多糖，是植物半纤维素的主要组成成分。木聚糖酶是可以将木聚糖降解成低聚木糖和木糖的水解酶，在饲料、造纸、食品、能源工业和环境科学上有着广阔的应用前景。

目前市面上的木聚糖大多数来源于原核微生物和真核微生物，包括多种外切酶和内切酶，其中，内切型木聚糖酶是木聚糖酶研究最透彻最广泛的一类酶。而随着各行各业对木聚糖酶的应用越来越广泛，各种实际运用对木聚糖酶的最适pH、温度和稳定性提出各种不同的要求，例如，在利用木聚糖酶对纸浆进行预漂白时，就要求所用的木聚糖酶具有耐碱和耐高温的特性，因此，用于造纸工业的木聚糖酶多属于耐碱、耐高温的碱性木聚糖酶，但现阶段发现的木聚糖酶温度和pH稳定性往往不能达到要求，造成利用效果很差。

发明内容

本发明的主要目的是提出一种木聚糖酶基因、重组质粒、重组菌株、木聚糖酶及其应用，旨在提供一种对碱和高温环境稳定性较高的木聚糖酶。

为实现上述目的，本发明提出一种木聚糖酶，所述木聚糖酶的氨基酸序列如SEQID NO：2所示。

此外，本发明还提出一种木聚糖酶基因xyn1923，用于编码如权利要求1所述的木聚糖酶，所述木聚糖酶基因xyn1923的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

此外，本发明还提出一种重组质粒，所述重组质粒携带如上文所述的木聚糖酶基因xyn1923。

可选地，包含表达载体pET-28a。

此外，本发明还提出一种重组菌株，所述重组菌株包含如上文所述的木聚糖酶基因xyn1923。

可选地，由携带所述木聚糖酶基因xyn1923的重组质粒转化大肠杆菌E.coliRosetta(DE3)获得。

此外，本发明还提出一种如上文所述的木聚糖酶在造纸中的应用。

此外，本发明还提出一种如上文所述的木聚糖酶在动物饲料加工中的应用。

本发明技术方案中，提供了木聚糖酶基因xyn1923、携带该基因的重组质粒以及重组菌株，该木聚糖酶基因xyn1923可以编码出一种木聚糖酶，该木聚糖酶的最适pH为7.0，在pH6.0至9.0环境下孵育16h，依然能够保持80％以上的剩余酶活力，最适温度为70℃，并且在60℃处理30min后，依然能够保持89％的剩余酶活力。本发明提出的木聚糖酶具有较佳的耐热耐碱性能，在造纸和动物饲料方面具有较好的应用前景。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅为本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为实施例1中PCR扩增片段的电泳图；

图2为本发明提供的木聚糖酶的SDS-PAGE测试结果图；