[发明专利]一种小肠切片的制备方法

说明书

本发明提供了一种小肠切片的制备方法，具体步骤包括：(1)将小肠的肠系膜钝性分离，出去血管和残留的脂肪块，然后将小肠内容物取出；(2)取出小肠内容物后，将肠壁沿肠系膜纵向剪开，使肠内壁向外翻出，充分暴露肠的粘膜层；(3)将剪开后的小肠固定在板上，然后浸入到台氏液中，置于恒温箱对肠腔进行冲洗；(4)将冲洗后的小肠从台氏液中取出，放入到固定液中进行浸泡固定；(5)以圆柱体为轴，将浸泡固定后的小肠外壁向内，内壁向外的缠绕在圆柱体上，进行定型；(6)将定型后的小肠从圆柱体上取下，然后依次进行冲洗、脱水、包埋、沿径向切片和染色。所述制备方法做出的小肠切片结构完整，不易破坏其结构，做法也省时、省工。

技术领域

本发明属于实验材料领域，具体涉及一种小肠切片的制备方法。

背景技术

小肠是消化和吸收的主要部位，腔面为环形皱襞，黏膜表面有许多细小的肠绒毛，在病理组织学观察中，常常需要对小肠进行病理切片，以观察疾病或药物对小肠的结构，小肠绒毛长度，隐窝高度等的影响；传统方法在制作小肠组织教学切片时，常常会出现组织易碎裂，细胞收缩，切片薄厚不均，染色太深或太浅使染色质结构在显微镜下观察不清晰，且一般对小肠的处理方法为选择某一段肠段进行横切，只能观察某一段小肠的具体结构，而无法观察整段肠上的病理变化，这对疾病的早诊断及治疗具有重要的作用，因此寻找一种小肠切片的制备方法以解决上述问题是具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种小肠切片的制备方法，以解决现有技术中存在的一个或多个技术问题，至少提供一种有益的选择或创造条件。

为实现上述目的，技术方案如下：

一种小肠切片的制备方法，所述制备方法的具体步骤包括：

(1)将小肠的肠系膜钝性分离，出去血管和残留的脂肪块，然后将小肠内容物取出；

(2)取出小肠内容物后，将肠壁沿肠系膜纵向剪开，使肠内壁向外翻出，充分暴露肠的粘膜层；

(3)将剪开后的小肠固定在板上，然后浸入到台氏液中，置于恒温箱对肠腔进行冲洗；

(4)将冲洗后的小肠从台氏液中取出，放入到固定液中进行浸泡固定；

(5)以圆柱体为轴，将浸泡固定后的小肠外壁向内，内壁向外的缠绕在圆柱体上，进行定型；

(6)将定型后的小肠从圆柱体上取下，然后依次进行冲洗、脱水、包埋、沿径向切片和染色。

所述步骤(3)中台氏液的添加量为450-600mL。

所述步骤(3)中恒温箱的温度为37-39℃。

所述步骤(3)中冲洗的时间为25-35min。

所述固定液为95％乙醇-聚乙二醇溶液。

所述固定液的添加量为220-350mL。

所述浸泡固定的时间为35-52h。

本发明的有益效果是：提供了一种小肠切片的制备方法，所述制备方法中使用的台氏液与体内pH值相近，且可维持肠绒毛营养和形态，有助于内容物排出，使得所制备的小肠切片清晰无杂质，所述方法中以圆柱体为轴固定小肠后进行径向切片，这样能够作出整个肠段的纵切面，便于观察具体构造，因此利用本发明所述制备方法所做出的小肠切片结构完整，不易破坏其结构，做法也省时、省工。

所述制备方法中所添加的固定液为95％乙醇-聚乙二醇溶液，其中乙醇与聚乙二醇都为醇类，易挥发，但相较与一般固定液中所含有的甲醛，多聚甲醛，bouin氏液，更易获取，且对人体无毒，不刺激呼吸道与黏膜，且该溶液对细胞胞核固定较好，结构清晰，还可保护细胞免受空气干燥后的人工假象。

附图说明