[发明专利]一种基于酶解法同时提取肝素钠和肠膜蛋白肽的方法

说明书

本发明涉及一种基于酶解法同时提取肝素钠和肠膜蛋白肽的方法，包括以下步骤：制备肠粘膜混合液；采用酶解法制备成酶解液；过滤得到澄清滤液和酶解浓缩液；滤液通过离子交换树脂柱进行肝素吸附，同时得到流出液；取下已吸附饱和的离子交换树脂柱，先用清洗盐水对离子交换树脂柱中的树脂进行清洗，然后采用脱附盐水对树脂进行肝素洗脱得到肝素钠洗脱液；将肝素钠洗脱液进行过滤脱盐和浓缩得到肝素钠浓缩液；干燥得到粗品肝素钠；对流出液进行降温，然后进行脱盐浓缩，得到第一浓缩液；将第一浓缩液进行真空浓缩，得到蛋白肽浓缩液；将蛋白肽浓缩液干燥，得到蛋白肽。该方法肝素钠提取率高、生产周期短，能同时提取蛋白肽，成本低、污染小。

技术领域

本发明涉及一种肝素钠的提取方法，尤其是一种基于酶解法同时提取肝素钠和肠膜蛋白肽的方法。

背景技术

目前，国内肝素提取有盐析法和酶解法两种工艺。盐析法是将肠粘膜加盐、加碱调pH，升温至50℃左右保温使肝素溶解转移到水中，然后升温至95℃使肠膜蛋白凝固，再分离得到副产物肠膜渣(或称肠膜蛋白)，分离得到的清液再经树脂吸附、解析、醇沉、烘干等步骤得到肝素。酶解法是将肠粘膜加盐、加碱调pH、加蛋白酶，升温至50℃左右保温使肠粘膜酶解得到酶解液，酶解液再经灭酶、树脂吸附、解析、醇沉、烘干等步骤得到肝素。和盐析法比较，酶解法具有肝素收率高、废水量少、食盐消耗低等优点，因而被广泛应用。

但是酶解法仍然存在以下问题：

生产周期长：传统方法树脂吸附的工序时间较长，一般需要8～10小时，容易导致料液变质发臭，氨基氮等成分含量增加，对后续的蛋白质成分提取利用造成了不利影响；

树脂利用率低：传统方法采用树脂投入吸附罐的方式，由于吸附罐内肠粘膜组织较多，并且树脂易被其中的油脂成分堵塞，堵塞后的树脂吸附能力大大下降，这些问题影响了树脂吸附；

树脂破损率高：树脂在吸附和脱附过程中都采用罐内长时、搅拌的方式进行，树脂破损率高；

废水量大：传统工业化生产方法的废水排放量大，盐含量高，尤其是酶解法工艺的排放水有机物含量很高，废水处理难度大，运行成本高；

危险性有机溶剂使用量大：传统生产方法采用乙醇沉淀、静置过夜的方式收集肝素，生产周期长，并且车间等级要求高、乙醇的回收、储存等运行管理要求苛刻，成本较高。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供一种能提高肝素钠的提取效率，增加产量，减少吸附树脂的用量及破损率，实现了原料的综合利用，降低了高盐高有机物废水排放，减少环境污染，降低成本的一种基于酶解法同时提取肝素钠和肠膜蛋白肽的方法，具体技术方案为：

一种基于酶解法同时提取肝素钠和肠膜蛋白肽的方法，包括以下步骤：

S101、制备肠粘膜混合液；

S102、将肠粘膜混合液采用酶解法制备成酶解液；

S103、过滤酶解液得到澄清滤液和酶解浓缩液；

S104、对澄清滤液采用离子交换树脂柱进行肝素吸附，同时得到流出液；

S105、取下已吸附饱和的离子交换树脂柱，先用清洗盐水对离子交换树脂柱中的树脂进行清洗，然后采用脱附盐水对树脂进行肝素洗脱，得到肝素钠洗脱液；

S106、将肝素钠洗脱液进行过滤脱盐和浓缩得到第二透过液和肝素钠浓缩液；

S107、将肝素钠浓缩液干燥，得到粗品肝素钠；

S201、对所述步骤S104中的所述流出液进行降温；

S202、对将降温后的流出液进行过滤脱盐和浓缩，得到第一透过液和第一浓缩液；

S203、将第一浓缩液进行真空浓缩，得到蛋白肽浓缩液；