[发明专利]一种干细胞冻存液有效
| 申请号： | 202010797418.5 | 申请日： | 2020-08-10 |
| 公开（公告）号： | CN111727962B | 公开（公告）日： | 2020-12-01 |
| 发明（设计）人： | 寇晓星;施松涛 | 申请（专利权）人： | 医微细胞生物技术（广州）有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;A01N1/02 |
| 代理公司： | 北京市万慧达律师事务所 11111 | 代理人： | 谢敏楠 |
| 地址： | 510000 广东省广州市南*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 干细胞 冻存液 | ||
1.一种干细胞冻存液，其特征在于，所述干细胞冻存液包含基础冻存液，并添加有异硫氰酸苯乙酯，所述异硫氰酸苯乙酯在所述干细胞冻存液中的浓度为1-10 μM，所述基础冻存液包含5v/v％~10v/v％的DMSO和90 v/v％-95v/v% 的FBS；所述干细胞为牙髓干细胞。
2.如权利要求1所述的干细胞冻存液，其特征在于，所述DMSO的浓度为10 v/v％，所述的FBS的浓度为90 v/v％。
3.如权利要求1所述的干细胞冻存液，其特征在于，所述异硫氰酸苯乙酯的浓度为10 μM。
4.一种干细胞的冻存方法，用权利要求1-3任一所述的干细胞冻存液冻存牙髓干细胞。
5.如权利要求4所述的干细胞的冻存方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将牙髓干细胞与权利要求1-3任一所述的干细胞冻存液混合；和
（2）进行程序降温至-80℃，然后转移至液氮中冷冻保存。
6.如权利要求4所述的干细胞的冻存方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
（1）冻存液的制备：制备权利要求1-3任一所述的干细胞冻存液；
（2）细胞悬液的制备：将牙髓干细胞离心洗涤，收集到的牙髓干细胞与所述冻存液混合得到细胞悬液，置于无菌的冻存管中；
（3）冷冻：将所述冻存管进行程序降温至-75℃～-85℃，然后转移至液氮中冷冻保存；
（4）细胞复苏：取出冻存管快速置于37-40℃水浴1-3分钟，振荡直至细胞悬液完全融化，离心，以PBS洗涤去除冻存液，即得复苏的细胞。
7.权利要求1-3任一所述的干细胞冻存液在牙髓干细胞冻存复苏中的应用。
8.一种干细胞的冻存试剂盒，其特征在于，包含权利要求1-3任一所述的干细胞冻存液，所述干细胞为牙髓干细胞。
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